自制血清蛋白电泳质控品用于室内质控地研究.pdfVIP

感嘲吨毛疾精实验室诊断目附会暨实验室管理论坛 论文{c鳊 自制血清蛋白电泳质控品用于室内质控的研究 王丽，张葵。顾光煜．黄群(南京大学医学院附属鼓楼医院检验科，南京210008) 摘要；目的比较血清蛋白电泳自制质控品和Helena商品质控品的性能，探讨自制质控品在血清蛋 统分别进行Helena质控品和自制质控品批内精密度测定、二种质控品电泳凝胶板间差异性比较测定、自 制质控品日间精密度测定和保存半年期自制质控品的测定。结果 自制质控品与Helena质控品相关性 好．电泳后各蛋白组分的批内C“均小于5％；二种质控品在不同琼脂糖板间的对比测定各蛋白组分的cv ％也均小于5％，具有较小的变异系数；自制质控品电泳后各蛋白组分的日问精密度除a-球蛋白7．37％、 使用的要求。是良好的室内质量监测的质控品。 关键词：混合血清：质控品：蛋白电泳：质量控制体系 年获得诺贝尔奖．由于传统的电泳分析(如醋酸纤维素薄膜电泳，CAE)手工比重较大．操作繁琐费时， 技术要求较高(电泳温度及时间、缓冲液离子强度的改变、电泳薄膜的脱色及透明等诸多因素)，影响了 分析结果的准确性和重复性，没有相应的质控品影响了蛋白电泳的标准化和质量评价体系的建立。目前 以凝胶为支持介质(如琼脂糖、聚丙烯酰胺)的凝胶电泳，相比纸质和醋酸纤维素膜为介质的固相电泳， 提高了电泳的分辨率和分离效果。 物，能自动完成一系列电泳程序，包括加样、电泳、保温、染色、脱色、烘干及自动扫描定量分析等， 已逐渐在各临床实验室推广应用，加上电泳仪器厂家对蛋白电泳标准和质控品的研发，为血清蛋白电泳 测定标准化及质量控制体系的建立奠定了基础。由于商品质控品的费用及供应问题影响了其进一步的推 广。本文研究了自制质控品及其性能、以自制质控品应用于血清蛋白电泳室内质量控制工作并与购买的 美国Helena公司商品质控品进行了同步比较测试．探索与评价以自制质控品在血清蛋白电泳室内质量 控制体系中的应用，为进一步进行血清蛋白电泳的标准化研究奠定基础。 2材料与方法 lI1仪器与试剂 SPIFE 美国HelenaSPIFE琼脂糖凝胶全自动电泳分析系统，包括：美国Helena2000快速电泳仪， 全自动染色、烘干系统、EDc光密度扫描仪、电脑分析打印系统以及琼脂糖凝胶电泳试剂盒。 1．2 血清蛋白电泳质控品 1．2．1Helena血清蛋白电泳质控品，批号：002508 项生化指标均正常的健康成人血清，经56℃加热半小时灭活制备成自制质量控制混合血清(质控品)， u 加入0．02％叠氮钠防腐．501分装．一70℃保存。每次电泳取一支室温溶解平衡，混匀后进行电泳，质 控品不可反复冻融。 1．3 方法 u 采用SPIFE2000全自动电泳分析系统，按试剂盒说明书进行电泳，取血清15l加入样品板中，通 作者简介：王丽，1963年生，女，主管检验师，主要从事临床化学检验工作。 105360。 通讯作者：张葵，E—m订：zkangkuieyah00．c∞．cn，Tel：025—83 感染性疾病实验室诊断习H寸会，E实验室管理论坛? ·论r文汇壕 过刀锋式点样片仪器自动取样、点样于琼脂糖凝胶电泳板上．以电压480v，电流20ⅡLA，电泳9lnin后 z球蛋 自动酸蓝染色液染色、脱色、烘干，进入EDc光密度扫描仪扫描并计算出白蛋白、a·球蛋白、a 白、B球蛋白、Y球蛋白的百分比浓度，打印输出。 1．3．1 Helena质控品批内精密度测定 取购买的美国Helena公司同一批号商品质控品按SPIFE琼脂耱凝胶电泳操作说明书，在同一块凝胶 板上测定20次，计算各蛋白成份的批