鸭病毒性肝炎病毒在人工感染雏鸭体内侵染规律地研究.pdfVIP

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十=攻学术研讨会 具有一定保护作用p‘101．也可用鸭瘟鸭病毒性肝炎二联弱毒疫苗通过肌注、滴鼻和口服途径 免疫1日龄雏鸭，5日龄可产生坚强的保护力p-“】。用DHv弱毒苗在母鸭产蛋前2．4周接种¨伽， 其后代可获得被动免疫。在鸭病毒性肝炎流行季节或地区，应用高免卵黄抗体作预防注射161 可使防治更为保险，在雏鸭发病时注射高免血清或高免卵黄抗体治疗【”埏减少感染鸭死亡、 降低经济损失的必要手段． 参考文献略 鸭病毒性肝炎病毒在人工感染雏鸭体内侵染规律的研究 胨海军‘～，程安春’·2一。汪铭书她2·。 《1．四川农业太学动物科技学院禽病防治研究中心，四川 雅安625014；2．动物疫病与人类健康四川省 重点实验室。四川雅安625014) 擅要肌注，滴鼻和口服逢经感染雏鸭．建立疾病模型。利用闻接免疫过氧化物酶染色方法时感囊后不 同时期雏鸭蛆奴石蜡切片中的鸭肝炎病毒进行检测．结果显示：不同途径感染雏鸭DHv后，病毒在爱拴样 品中出现的顺序有盖异．肌注组：肝脏，脾脏肾脏，十二指腼胰腺，肌内．空肠心脏、胸腺，法氏 囊．哈氏腺、回腑．盲肠．直肠肺，脑；口服组：肝脏脾脏、肾脏胰腺、胸腺、哈氏腺．法氏囊． 肌肉．十二指肠．空肠，回肠，直肠盲肠心脏，肺脏脑；滴鼻组：肝脏脾脏、肾脏，肺脏胰腺、 法氏囊、十二指肠，空晒胸腺．哈氏腺、肌肉．回肠，盲腑．直肠心脏、脑．阳性组织细胞泉内均出 现了IIs染色的特异性棕黄色产物．由此表明。鸭肝更病毒在感染后。广泛分布于雏鸭的各种组织器官， 并主要侵害肝．睥、肾、胰及腿部肌肉．继而引起相应的病理变化。肌注组病毒的检出时间明显早于滴鼻 组和口服组． 关键词鸭肝交病毒；诬染规律；问接免疫过氧化轴酶染色 速的病毒性疾病．以肝炎为主要特征II“J。目前世界上所有主要养鸭地区均有本病存在． 是危害养鸭业最为严重的疾病之一，给养鸭业带来极大损失和严重威胁。Hwang等13J运用组 织匀浆结合病毒滴定法研究表明，病毒存在于感染鸭的脑、肺、心、肝、脾等器官及腿部肌 肉中，程国富等141应用单克隆抗体PAP法，对人工感染鸭肝炎病毒雏鸭的组织切片进行免疫 组织化学原位染色观察，感染后3h，雏鸭心、肝、脾、肾、胰、腿部肌肉、脑组织细胞的 有特异、直观和敏感的特点，通过普通光学显微镜即可判定结果，在人类肿瘤等检测中得到 广泛使用，但应用于动物医学研究中的报道相对较少【5】，本研究在建立雏鸭病毒性肝炎疾 病模型的基础上，运用间接免疫过氧化物酶染色法。对感染后不同时期的雏鸭组织器官切片 进行了鸭肝炎病毒的定位和分布特征的研究，旨在了解鸭肝炎病毒在雏鸭急性病例体内的分 布规律，对阐明鸭肝炎病毒的致病机理、感染的早期诊断和检测等都很重要．为更好地控制 该病提供更多的理论依据。 l材料与方法 1．1毒株 DHv．1．Xc强毒株，四川农业大学禽病中心分离、鉴定并保存，使用前经非免疫胚传代 复壮并测定其LD∞。 1．2试验动物和鸭胚 1日龄雏鸭由四川农业大学实验动物中心提供；10日龄非免疫胚，由四川农业大学实验 动物中心提供。 ·为通讯作者 745 禽娄传染病 L3试验用血清和酶标抗体 兔抗DHv高免血清，由本人经蔗糖密度梯度离心纯化的DHV抗原。免疫兔制备；HRP 标记的山羊抗兔抗体、DAB，购自华美生物工程公司。 1．4人工感染试验 将1日龄雏鸭随机分为4组，每组30只。第1组30只肌注感染组，第2组口服感染 DHV-l·xc强毒株尿囊液0．5m1． 组，第3组滴鼻感染组，试验组每只雏鸭接种1000LD50 对照组每只雏鸭肌肉注射生理盐水0．5ml，试验组和对照组分开饲养。 1．5待捡样品的采集和制备 攻毒后的lh、2h、4h、6h、12h、24h、36h……14d等时间点采集样品，分别采集： 心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、跆氏腺、法氏囊、胰腺、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、 直肠、肌肉等16个组织器官。从雏鸭大量死亡的开始，每次剖检死亡或濒临死亡的雏鸭， 具有明显临床症状的鸭子，雏鸭具有倒地侧卧、以嚎触地、后肢呈划船状，便立即剖检。将 采集的组织固定于4％多聚甲醛