转移因子口服液制备方法地研究.pdfVIP

转移因子口服液制备方法的研究 闫肃杨琳 申镇维 闫素志夏天瑶孟祥文郭宝Jtr_耿星海徐志宝 长春生物制品研究所，长春，130062 【摘要】 目的探索转移因子口服液制备方法。方法猪脾为材料，去脂肪细胞破碎，离心澄清、超滤、除 菌，按围家药品监督管理局国家药品标准用Folin酚法进行全面检定。结果用上述工艺提取的转移因子口服 均符合转移因子的制备要求，无菌试验，免疫活性测定均达到国家的药品标准。结论使用该生产工艺制备的 转移因子口服液，具有周期短、质量稳定、产量高、含量高、生产成本低，可大规模生产。 【关键词】猪脾；转移因子口服液；活性测定 Facfor 转移因子(TransferTF)属于淋巴因子，为 品监督管理局国家药品标准》规定方法项目检测；多 一种免疫调节剂，已在临床应用多年，疗效确切，在 肽含量，核糖含量，无菌试验，pH值测定、蛋白质反 原发性免疫缺陷病或慢性病毒感染疾病中作为免疫 应，E260nm／E280nm、比值最大吸收、外观等。 治疗药物作用，目前已得到肯定，特别病毒上呼吸道 2．3淋巴细胞E玫瑰花试验检测：制备脱E受 感染治疗取得良好效果【4J。本文采用猪脾、提取转 体胸腺T细胞悬液及绵羊红细胞悬液，取小试管6 移因子，制成口服液，对其理化性质和生物活性进行 支其中3支各加Hank7s液0．1ml作对照，另3支加 检定，为产品可靠安全提供依据。 供试品溶液测定，每管中各加脱E受体胸腺T细胞 1．材料和方法 悬液0．2ml，摇匀离心，弃上清液，每管中各加固定液 1．1材料：猪脾来源于长春市肉联厂经检疫的 一滴染色，在显微镜下数淋巴细胞结花率，求E玫瑰 健康猪脾。纸浆，将滤纸搅碎灭菌制备，仪器，超滤 花结增高率，比较实验管和对照管间的差异。计算 公式样品活力=(样品测定管平均值一对照管平均 器，美国Mllpore公司生产，离心机、美国贝克曼公司 生产。紫外分光光度计，UV8500型上海天美仪器厂值)x100％。 产品。 2．4急性亚急性毒性试验：选18—209昆明小 2．方法 鼠6只，给口服转移因子一次lOmg／lml灌服，观察 2．1转移因子口服液制备方法：用注射用水洗3小鼠有无急性中毒反应及致死。另选30只小鼠，分 3组。第l组口服转移因子，每日1次，每次lml，第 次，再用生理盐水洗两次，用胶体磨研磨，4000r／min x3，使细胞破碎，经检测无完整细胞，水浴化冻，反 2组注射猪脾转移因子，每131次，每次0．5ml，共给 35 复5次后离心(4000r／minmin)收集上清液，弃沉药3次，每次给药后观察有无过敏及异常反应，如活 淀，再用布氏漏斗经纸浆澄清，澄清后，将澄清液通 动、毛发等。l周后测量体重，与对照比较。 过0．8t．tm的滤膜，再用l万分子量截流值的超滤器 结 果 超滤，所得滤液即为转移因子。将生理盐水，转移因 子滤液和甘露醇，按体积进行混合，加人防腐剂 3．1理化性质的检测：各项指标达到国家药品 标准WSl．XG-037．2000，见表1。 (0．2％苯甲酸钠)，稀释成每毫升lmg多肽，核糖 用新工艺超滤法提取的转移因子口服液，试制 30t-g用0．2tma滤过除菌转移因子口服液每瓶分装 10Ⅱd。 三批转移因子口服液理化检测指标均达到国家药品 2．2转移因子口服液理化性质检测：按《国家药 标准，见表2。