藤茶多糖AGP-3的分离纯化与结构的初步鉴定_药学论文.docVIP

藤茶多糖AGP-3的分离纯化与结构的初步鉴定_药学论文 藤茶多糖AGP-3的分离纯化与结构的初步鉴定_药学论文 作者：罗祖友　陈根洪　郑小江　吴谋成 【摘要】 目的对藤茶水溶性多糖进行分离纯化得到AGP-3组分，并对其结构进行初步的鉴定，为藤茶多糖结构与生物活性关系的研究奠定基础。方法采用DEAE-Sephadex A-25、Sephadex G-200和HPLC对藤茶多糖分离纯化，并通过IR、GC、1HNMR和13CNMR分析对藤茶多糖AGP-3组分的结构进行了初步鉴定。结果AGP-3重均分子量(Mw)为1.02×105 Da，含中性糖质量分数57.6%、糖醛酸32.3%、蛋白质3.5%。结论藤茶多糖分离组分AGP-3为一种含蛋白质的复合多糖。 【关键词】 藤茶；多糖；分离纯化；结构鉴定 　　Isolation and Purification and Preliminary Structure Identification of Polysaccharide Fraction AGP-3 from Ampelopsis grossedentata 　　Abstract：ObjectiveTo provide a basis for the research about the relation between the structure and its bioactivities of polysaccharides from Ampelopsis grossedentata. The polysaccharide fraction AGP-3 was obtained and analyzed preliminarily after water-soluble polysaccharides from Ampelopsis grossedentata being isolated and purified.MethodsThe water-soluble polysaccharides from Ampelopsis grossedentata were isolated and purified with DEAE-Sephadex A-25, Sephadex G-200 and HPLC, and the structure of AGP-3 was analyzed preliminarily by IR, GC, 1HNMR and 13CNMR. ResultsThe molecular average-weight (MW) of AGP-3 was 1.02×105 Da, containing 57.6% neutral sugar, 32.3% uronic acid and 3.5% protein.ConclusionThe polysaccharide fraction AGP-3 from Ampelopsis grossedentata is a kind of conjugated polysaccharide containing protein. 　　Key words：Ampelopsis grossedentata； Polysaccharide；Isolation and purification； Structure identification 　　藤茶 Ampelopsis grossedentata(Hand-Mazz)W.T.Wang，属于我国特有的类茶植物，具有悠久的民间药用历史［1］。据记载，藤茶入药性味甘淡、清热解毒，主治黄疸型肝炎等［2］，现代研究证实藤茶富含黄酮等重要的生物活性成分［1，3］。大量研究表明，植物多糖，尤其是从中药材中提取的水溶性多糖，如枸杞多糖、银杏多糖等具有免疫调节、抗氧化、降血糖、抗肿瘤等多种生物活性［4，5］。实验对藤茶水溶性多糖组分AGP-3的提取、分离和结构进行研究，为考察藤茶多糖结构与生物活性的关系奠定基础。 　　1 材料与仪器 藤茶由鄂西藤茶公司提供； DEAE-Sephadex A-25和Sephadex G-200，Pharmacia（USA）产品；牛血清白蛋白，中科院新疆化学所生化试剂厂；葡萄糖醛酸，Sigma产品；多糖标准品为Pullulan系列，日本东京化成公司产品；其它均为国产分析纯试剂。 　　日本岛津UV-265 FW紫外可见分光光度计；旋转蒸发仪，Buchi RE111，Switzerland；气相色谱分析仪，GC-9A Shimadzu，Japan（浙大智达N2000气相色谱工作站）；高压液相色谱仪（RI检测器），Agilent 1100，USA；红外光谱仪，Thermo Nicolet Nexus