骨形成蛋白9于2型糖尿病时在肝组织中的表达_医学论文.docVIP

骨形成蛋白于2型糖尿病时在肝组织中的表达_医学论文 骨形成蛋白于2型糖尿病时在肝组织中的表达_医学论文 【摘要】 目的研究2型糖尿病鼠肝组织骨形成蛋白（bone morphogenetic proteins，BMP）基因转录及蛋白表达的变化。方法将大鼠随机分为2型糖尿病模型组与正常对照组，分别于造模后5、10、20 d处死，以RT及Western对肝组织BMP基因转录及蛋白表达水平进行检测与分析。结果2型糖尿病模型组BMP基因转录及蛋白表达水平与正常组相比均显著性降低（P＜0.05）；并且2型糖尿病大鼠5、10、20 d处死组BMP基因转录及蛋白表达水平呈逐步下降趋势。结论2型糖尿病大鼠肝组织BMP基因转录及蛋白表达水平较正常显著降低，这一变化可能与2型糖尿病的发生发展相关。 【关键词】 骨形成蛋白型糖尿病 肝组织 Expressions of bone morphogenetic proteins Abstract: Objective To study changes of bone morphogenetic proteins (BMP)9 gene transcription and protein expression in liver of type 2 diabetic rats.MethodsTotally 20 Wistar rats were selected and randomly devided into type 2 diabetic model group and normal control group. Rats were killed at corresponding time point, and then BMP9 gene transcription and protein expression in liver were detected by RTPCR and Westernblot analysis. Results BMP9 gene transcription and protein expression in type 2 diabetic model group were significantly lower than that in the normal control group（P＜0.05）. Conclusion The BMP Keywords: bone morphogenetic proteins9 type 2 diabetes mellitus liver tissue 糖尿病以胰岛素绝对或相对缺乏引致各种代谢紊乱为主要特征，其病因尚未完全阐明。随着研究的逐步深入，越来越多的致病因素纳入了研究者的视野。近期，通过高通量功能基因组筛选，Groop等发现骨形成蛋白（bone morphogenetic proteins，BMP）与糖、脂代谢过程中某些关键酶的表达调控相关，提示BMP可能是一种新的代谢调节因子［1］。据此推测，BMP编码基因也许是糖尿病发生过程中被忽略的又一重要因素，研究其与糖尿病的关联具有重要的意义。本研究以2型糖尿病大鼠为模型，初步探讨2型糖尿病鼠肝脏中BMP基因表达的变化及其意义。 1材料与方法 1.1动物和试剂 Wistar大鼠购自第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所实验动物中心，雄性20只，清洁级，年龄6～8周，质量180～220 g。链脲佐菌素（streptozotocin，STZ，Sigma公司）、TriPure TM Isolation Reagent Kit（Boehringer Mannheim公司）、BIO凝胶电泳装置及凝胶扫描分析系统（美国）、抗大鼠BMP单克隆抗体（Dr.Harvery惠赠）、二抗购自Southern Biotechnology公司。 1.2模型制备 Wister大鼠分为2型糖尿病模型组15只与正常对照组5只。所有大鼠实验前均经适应性饲养1周，并按屏蔽环境内动物实验观察与操作规范进行实验［2］。2型糖尿病模型建立参照郭啸华等人方法［3］：先以高热量饲料(基础饲料加蔗糖、炼猪油等混合而成，总热量18.9 kJ/g，脂肪17.63%，碳水化合物50.64%，蛋白质13%)喂养4周，而后按30 mg/kg体重剂量予以STZ（柠檬酸钠缓冲液配成0.25%）腹腔注射，继续饲以高热量饲料4周，以随机血糖大于11.1 mmol/L作为糖尿病成模标准。15只模型组大鼠均满足上述标准，制模成功后随机分为5 d处死组、10 d处死组与20 d处死组，每组5只，于相应时间分别予以处死，取肝组织用于实验。正常对照组则予以相同剂量生理盐水腹腔注射，饲以普通饲料，并于20 d时处死，取肝组织用