新江苏云金杆菌35高效菌株小试生产发酵影响因子地研究.pdfVIP

新疆苏云金杆菌35 高效菌株小试生产发酵影响因子的研究 1 2 2 史应武 赵思峰 李国英 1 2 （ 新疆特殊环境微生物实验室，新疆 乌鲁木齐 830000；新疆兵团绿洲生态实验室，新疆 石河子 832003） 摘 要 通过以棉铃虫 4 龄幼虫为供试昆虫的生物测定，对从新疆兵团 145 团棉田自然死亡棉铃虫体内分 离筛选到的一株高效苏云金杆菌（Bacillus thuringiensis, Bt）菌株 35，进行了发酵工艺的初步研究。 对Bt 菌株35 进行了摇瓶发酵和小试发酵，利用2L 全自动发酵罐优化了发酵培养基和操作条件。优选培养 基的组分为：棉籽饼3.25%、玉米粉 1.4%、麸皮 1.2%、KH PO 0.11%、FeSO 0.0049%，该培养基与对照培养 2 4 4 基相比，发酵液含菌数高达 40.8×108cfu/mL, 比对照培养基提高了 63.7%，发酵液毒力高达 66.1%，比对 照培养基提高了81.5%。利用CaCO3 调节pH 值，可使活菌数提高37%，发酵周期缩短9h；28℃发酵活菌数 比30℃增加 12.1%，发酵时间延长3h，最适发酵产孢温度为30℃；以芽孢接种，其发酵时间比营养体接种 延长3h，最优接种方式为营养体接种；溶氧对发酵有较大的影响，当发酵全程采用 1:0.8vvm的通气量时， 最终发酵菌数为38.1×108cfu/mL；当发酵前期、中期、后期的溶氧分别为 1:1.0vvm、1:1.4vvm及 1:1.2vvm 时，活菌数可达72.5×108cfu /mL，发酵水平提高约 1倍。对Bt 发酵液进行生物测定，发酵原液（Bt 离心 沉淀物+上清液）的LC50 比去掉上清液的沉淀物提高了37.1%，说明上清液能提高发酵液的毒力。 关键词 苏云金芽孢杆菌 发酵影响因子 STUDIES ON FERMENTATION FACTOR OF INFLUENCE OF SMALL TEST PRODUCTION FOR HIGH EFFECT BACILLUS THURINGIENSIS 35 IN XINJIANG 1 2 2 SHI Yingwu ，ZHAO Sifeng ，LI Guoying 1 （Institute of Microbiology, Xinjiang Academy of Agrculture Science，Urumqi 832200，Xinjiang, China 2 The Oasis Ecological Lab.Xinjiang BING TUAN，Shihezi，Urumqi 832003，Xinjiang, China） Abstract A high effect of Bacillus thuringiensis 35 strain was isolated and screened from natural death bollworm in No. 145 BINGTUAN in Xinjiang. And the manufacting technique of Bacillus thuringiensis 35 strain was studied. The fermentation culture medium and the fermentation technique was had been optimized by shaker and small fermentor. The orthogonal design has been developed for the superior experiment of 35 strain，s fermentati