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第33 卷 分析化学 （FENXI HUAXUE ） 评述与进展 第8 期 2005 年8 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1199 ~ 1204 荧光素类探针在生物分析中的研究进展 葛凤燕 闫喜龙 潘惠英 周小丽 陈立功＊ （天津大学药物科学与技术学院，天津300072 ） 摘 要 综述了近些年来荧光素及其衍生物领域的研究进展，尤其是对用于生物分析的荧光探针材料的研 究状况和发展趋势进行了探讨。 关键词 荧光探针，荧光素衍生物，生物分析，评述 ! 引 言 荧光分析方法灵敏度高，选择性好，试样量小，在分析化学，特别是在生物分析中有较广泛的应 用［1 ~ 3 ］。由于大多数生物分子本身无荧光或荧光较弱，检测灵敏度较差，人们用强荧光的标记试剂或荧 光生成试剂对待测物进行标记或衍生，生成具有高荧光强度的共价或非共价结合的物质，使检出限大大 降低，这就是荧光探针技术。随着生物技术的不断发展，荧光探针技术已经在蛋白质、核酸、细胞检测及 免疫分析等方面发挥了重要作用［4 ~ 7 ］。尤其近年来发展起来的荧光化学传感器和分子信号系统的应用 ［8 ］ 已深入到药物学、生理学、环境科学、信息科学等多个领域 。 目前用于标记或衍生的荧光探针主要有荧光素类、罗丹明类、邻苯二甲醛类等化合物。其中荧光素 ［9 ，10 ］ 及其衍生物在生物领域中的研究占有极其重要的位置，一直是化学及生物分析领域中研究的热点 。 虽然国外在研制开发荧光素衍生物方面相关报道较多，但缺乏条理性和系统性，而国内在此领域的研究 起步较晚，现有报道仅停留在原有荧光素衍生物的简单应用方面。为此，本文主要对国内外在荧光素衍 生物的设计合成及在生物分析中的研究状况和发展趋势作了综述。 # 荧光素 荧光素及其衍生物是重要的荧光探针材料，属于呫吨染料。荧光素1（fluorescein ）又称荧光黄，化 学名称为3 ，6 -二羟基螺［异苯并呋喃-1（3H ），9 ，-（9H ）-呫吨-3-酮］或9-（邻羧苯基）-6-羟基-3H-呫吨- 3-酮。由于氧桥键把两个苯环固定在一个平面上，使分子具有刚性共平面结构，在激发光的作用下能产 生强烈的荧光。 荧光素具有高的消光系数，激发和发射波长都在可见光区，在水中具有较高的荧光量子产率，无毒， 成本低等优点。自187 1 年Bayer 首次合成出荧光素至今一百多年的时间仍然被广泛的应用于研究蛋 白质的结构特性。但其所具有的特定属性也限制了它在许多研究领域中的进一步应用：（1 ）较小的 ［11］ ［12 ］ Stoke 位移，使得样品背景对荧光的干扰相对较大 ；（2 ）荧光量子产率对pH 值敏感 ，在生物体内的 ［13 ］ 生理环境下荧光量子产率降低；（3 ）具有对光敏感的基团，在强光检测下容易分解 ；（4 ）亲脂性差，不 宜渗入细胞，因而用于细胞的研究效果差；（5 ）特异选择性差。 $ 荧光素的结构修饰及在生物分析中的应用 为了改善荧光素的性能，国外许多化学及生物学家通过引入不同功能的化学基团对荧光素的结构 2004 -04 -26 收稿；2004 -07 -28 接受 分 析 化 学 第33 卷 1200