葡萄不定芽离体诱导再生植株地研究.pdfVIP

第5期 河北林业科技 2004年10月 葡萄不定芽离体诱导再生植株的研究* 陶建敏，耿其芳，庄智敏，蔡斌华，章镇 (南京农业大学园艺学院，南京210095) 摘要：进行了紫苑、魏可和砧木99R几个葡萄品种不定芽离体诱导再生植株的研究。实验通过对其叶片、叶柄、茎 段外植体的诱导再分化，以器官发生途径实现植株再生。结果表明：不同品种问存在差异：(1)紫苑不定芽诱导再生效果 关键词：葡萄；不定芽；再生 文献标识码：A 中图分类号：$663·1 葡萄(VitisL．)属于多年生藤本浆果类果树，其栽培 1．2试验方法 历史悠久，为世界第二大水果，它也是最先进行组织培养 在春天晴天下午取3个种葡萄品种的新抽生的嫩梢 的作物之一。1961年Galzy成功培养了葡萄茎尖，并进行1～3节，去除叶片，剪成约3cm左右带单芽的茎段，流水 cul— 了葡萄低温离体保存，1969年又首创节培法(nodal冲洗2～4h，然后进行消毒处理。消毒处理方法：70％的 ture)进行了葡萄茎尖培养和脱毒[1]。到上世纪70年代 末，许多学者开始从葡萄花药、叶片、茎尖碎片和茎段中再 生成功不定芽，但再生率普遍较低，但其为后续的研究奠 右的带腋芽茎段接入初代培养基中，腋芽萌发后，转入增 定了基础。进入上世纪90年代以后，从事葡萄不定芽再 殖培养基，待腋芽长至1～2cm时，剪下新芽转人生根培 生研究的学者增多，葡萄再生体系的研究得到了快速发 养基按常规方法进行快繁，建立无菌培养体系(图1)。待 展。Elisabeth A．等‘“、卢炳之等‘“、L． 苗高5cm左右，长有3～5片叶时，剪取完全展开的嫩叶， Clog等‘“、James 将叶片沿四周剪成长方形，叶正面朝上放于培养基上，叶 Torregrosa等[“、陈力耕等嘲和周鹏等[力分别利用葡萄的 叶片、叶柄和花丝等外植体，通过器官发生途径获得再生 柄剪成约0．5cm左右的小段，平放于培养基表面。 植株；LueiMartinelli等‘”、EmershadR．L．等‘…、Reustle1．3培养基与培养条件 G．等n。]、ZhuY．M．等‘1“、张克忠等‘1“、C．K．Salunkhe 基：3／4MS+BA 等m3和于向荣等‘“3分别利用葡萄的叶片、叶柄等外植体 0．5mg／L+GA30．4mg／L。③生根培养 和原生质体，通过体胚发生途径获得了再生植株。尽管如 基；3／4MS+IBA0．4mg／L。④叶片、叶柄再生培养基：MS +IBA 此，由于葡萄生长周期长，基因数量多且多里杂合状态，不 0．01～0．20mg／L+BA1．0～4．0mg／L。 同的研究者从事不同葡萄类型研究所获得的再生体系差 上述培养基琼脂用量为6．59／L，蔗糖为309／L，pH6． 异较大，这就大大限铷了人们利用葡萄的再生体系从事遗 2左右。叶片、叶柄、茎段黑暗培养3周后，再将其置于散 传转化的进程。因此，对一些优良葡萄品系进行系统的再 生体系的研究具有重要的意义。本文选取了栽培品种紫 (25士2)℃。 苑和魏可及砧木品种99R作试材，对再生体系的建立进 1．4计算式 行了初步研究。 再生频率(％)一(再生不定芽的外植体÷调查外植体 1材料和方法 数)×100％ 1．1 供试材料 2结果与分析 2．1 试管苗叶片、叶柄及茎段愈伤组织及不定芽的形成