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工艺管理工艺管理 微生物菌液工业发酵工艺研究 卢灵珍 王新亮 郝春雷 中国石化河南油田分公司石油工程技术研究院 河南郑州450046 摘要：比较不同培养基对菌种繁殖和代谢表活剂的影响，以 根据培养基对菌种的培养效果，对于降粘菌和防蜡菌来说， 及各培养基的成本，确定ZY 培养基为降粘菌和防蜡菌的发酵培 无论是复合菌还是单菌，除ZD培养基稍差以外，菌种以其它三种 养基。以初试发酵罐进行发酵模拟实验，确定发酵罐工作参数 培养基进行发酵时的繁殖、代谢表活剂能力，彼此相差不大。因 为：40℃、pH 值6~8、发酵时间72h。以初试发酵罐参数为参考进 此，主要通过比较培养基成本来进行培养基优化。比较成本，选 行工业发酵，发酵后菌液中菌体浓度为2 ～4× 108个/ mL ，降粘菌 择ZY培养基为降粘复合菌及防蜡复合菌菌种的发酵培养基。 降粘率和防蜡菌防蜡率分别为63.6%和69.7%。证实工业发酵成 （2）发酵搅拌转速影响研究 功，可进行现场应用试验。 结果可见，搅拌转速对降粘菌和防蜡菌发酵影响规律相近， 关键词：微生物降粘；微生物防蜡；发酵工艺 都是在发酵罐搅拌转速高于400rpm时差别不大；当转速降至 200rpm时，菌体浓度有所下降，但同最高菌体浓度相差不到30%， 微生物采油技术，是指利用微生物产生有用的代谢产物或者 远小于一个数量级。因此发酵罐搅拌转速对菌液发酵影响不 利用微生物能够分解碳氢化合物的性能，促进原油开采的技术。 明显。 该项技术以适应性强、作业简单、对油层无伤害等优势，已经引起 4.发酵时间的确定 世界各国的普遍重视[1-3]。 降粘菌和防蜡菌规律相似。0-24h时为菌种发酵对数生长 微生物菌种进入现场应用前，需应用发酵工艺进行工业发酵 期，在24h~48h，pH值和表面张力持续下降；到48h~72h，发酵基 生产。可在实验室进行发酵初试研究，再以得到的发酵参数为参 本稳定，表面张力达到最低，pH值上升；到96h，菌浓已开始下降， 考进行工业发酵生产。工业发酵完成后检测菌液指标，验证发酵 进入衰败期。如单纯考虑菌体浓度，则发酵48h~72h比较合适。 效果。 工业发酵时由于罐体更大，装液量更多，会导致发酵速度更慢，所 一、实验材料与方法 以选择72h为工业发酵时间。 1. 实验材料[4] 5.工业发酵产品性能检测 LB培养基，ZJ培养基，ZY培养基，ZD培养基。 为便于操作，三级发酵时间温度均为40℃，pH6~8，时间统一 降粘和防蜡菌种均为实验室已筛选出的菌种。 设定为72h。一级发酵搅拌频率为200rpm，二级发酵120rpm，三 实验原油为河南油田南部陡坡带泌304区块赵安4005井 级发酵100方/h。 原油。 以河南油田南部陡坡带泌304H1段稠油检测发酵菌液的降 2.实验方法 粘率；以H2段高凝油检测发酵菌液防蜡率。结果表明降粘菌菌 （1）发酵培养基优化 体浓度为3.7×108个/mL，防蜡菌菌体浓度为2.3×108个/mL，降粘 查阅文献，确定LB、ZJ、ZY、ZD为备选培养基，分别接种各菌 菌降粘率为63.6%，防蜡菌防蜡率为69.7%。 种母液，检测菌体浓度并检测表面张力，以确定发酵培养基。再 结论 比较各培养基成本，选择价格相对低廉的培养基。 比较不同培养基对菌种繁殖和代谢表