组氨酸的盐酸组氨酸细菌内毒素检查方法标准研究.pdfVIP

医药导报2010年8月第29卷增刊 ·17l· 4，6，8h进样测定，6次测定峰面积的RSD为0．20％，结果表明 破坏产生的降解产物以及合成过程中的各步中间体均能够与 供试品溶液在室温下稳定。 主峰很好分离，因此该流动相能够用于本品含量测定。 2．10供试品含量测定取对照品溶液及供试品溶液各 [DOI]10．3870／yydb．2010．08增．113 20止，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积 [参考文献] [1]张家麟．药物临床信息参考[M]．成都：四川科学技术出版社。 计算，结果批号为080204，080301，080302的供试品含量分别为 2006：937—938． 99．50％，100．3％，102．1％。 3讨论 [2]张树才，王敬慧，王群慧，等．托泊替康联合顺铂与足叶乙苷联合 卡铂一线治疗小细胞肺癌的随机临床研究[J]．结核病与胸部肿 实验中未检索到可供参考的流动相，笔者以水-甲醇 60： 瘤杂志，2007，3 2 ：l邸一192． 40 为初始流动相进行摸索，通过增加三乙胺和调节pH值改善 M，ARGIRISA，MURRENJ the 0f [3]SIMON R．Pmgre鹪intlIempy 峰型和分离度，通过调节配比改变主峰保留时间，最终确定流 ceu smMl RevOncol luIlgc蚰cer[J]．cm 000 动相为三乙胺溶液 取三乙胺5．0mL，加水至1 mL，用磷酸 119一133． 调pH值约为4．0 ．甲醇 65：35 ，采用该流动相，强烈条件下 组氨酸与盐酸组氨酸细菌内毒素检查方法标准研究 杨雅婷，何开勇，周素文 湖北省食品药品监督检验研究院，武汉430064 [摘要]目的用细菌内毒素检查法代替家兔热原法，建立组氨酸、盐酸组氨酸细茵内毒素检查方法。方法 按《中华人民共和国药典 2005年版二部附录ⅪE 细茵内毒素检查法 进行实验和结果判断。结果组氨酸、盐酸组氨 酸最小有效稀释浓度分别为7．35，8．93 rag·mL一。用适宜的方法调节pH后，对细菌内毒素和鲎试剂不产生干扰。结 论组氨酸、盐酸组氨酸用lmol·L“氢氧化钠溶液调节pH后可克服干扰，建立细菌内毒素检查法。 [关键词] 组氨酸；组氨酸，盐酸；细茵内毒素；干扰实验 [中图分类号]11977．4；11927．2[文献标识码]A 组氨酸和盐酸组氨酸均为氨基酸类药。《中华人民共和国 药典 2005年版采用热原检查法控制样品内毒素含量。但家兔仪、DHG-9246型电热恒温鼓风干燥箱。 试验时，动物疼痛反应较大，不利于进行实验。根据细菌内毒 2方法与结果 素检查法灵敏度高、快速、准确、操作简便等要求，笔者在本实 2．1 TAL灵敏度复核按《中华人民共和国药典 2005年版二 验中按照《中华人民共和国药典 2005年版二部附录细菌内毒部附录“鲎试剂灵敏度复核实验”项下进行操作，结果均符合规 素检查法研究了组氨酸与盐酸组氨酸对内毒素与鲎试剂反应 定。 的干扰情况，建立了组氨酸、盐酸组氨酸细菌内毒素检查方法， 2．2 细茵内毒素限值 L 组氨酸细菌内毒素限值为 以替代热原实验。 17EU·g～。盐酸组氨酸细菌内毒素限值为14EU·g～。 1材料与仪器 2．3供试品最小有效稀释浓度由公式c 了A计算。当TAL 1．1 药物及试剂 组氨酸 原料药，批号：座机电话号码，湖北省潜 L 江市四维氨基酸有限公司生产 ，盐酸组氨酸 原料药，批号： 灵敏度为0．125EU-mL一，组氨酸最小有效稀释浓度为 座机电话号码，湖北省潜江市四维氨基酸有限公司生产 。细菌内7．35 rag-mL～。盐酸组氨酸最小有效稀释浓度为 EU，批号：200758，中国 毒素工作标准品 WSE，规格：每支140 8．93 nag·mL～。 药品生物制品检定所提供 。鲎试剂 TAL，①批号：0801312， 2．4干扰实验 规格：每支0．1mL，灵敏度：0．125EU·mL一，湛江安度斯生物2．4．1干扰实验胁测定用细菌内毒素检查用水将细菌内毒 有限公司生产。②批号：0810280，规格：每支0．1mL，灵敏度： 素工作标准品进行稀释，使其最终内毒素浓度分别为2．0，1．0， 0．125 EU·mL一，湛江博康海洋生物制品有限公司生产 。细 0．5，0．25h稀释系列，各取0．1mL加入到复溶的鲎试剂反应管 菌内毒素检查用水 BET水，规格：每瓶50mL，批号：0801300， 内，每浓度重复4管；同时用细菌内毒素检查用水做2支阴性管 湛江安度斯生物有限公司生产 。 NC ．以上各管分置37℃水浴中反应1h，观察反应情况并计 算西值。 【收稿日期]2009一04—25 2．4．2干扰实验助测