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地锦草提取物对红色毛癣菌酶活性的影响_临床医学论文 地锦草提取物对红色毛癣菌酶活性的影响_临床医学论文 作者：安惠霞，李治建，古力娜·达吾提，斯拉甫·艾白 【摘要】 目的研究地锦草提取物对红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶和β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶的影响，探讨其抗真菌作用机制。方法药物干预红色毛癣菌后分离菌体，按试剂盒要求处理样品，利用酶联免疫法和荧光分光光度法，研究地锦草提取物对红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶和β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶活性的作用。结果地锦草提取物256 μg·ml-1时，可显著降低红色毛癣菌中角鲨烯环氧化酶的活性(0.01);不同浓度的地锦草提取物，均可降低红色毛癣菌β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶的活性(0.01)。结论地锦草提取物抗真菌机制可能与抑制角鲨烯环氧化酶和β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶的活性有关。 【关键词】 地锦草提取物; 角鲨烯环氧化酶; 酶联免疫吸附试验; β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶; 荧光分光光度法 　　Abstract：ObjectiveTo study the effect of Euphorbia humifusa extract(EHE) on squalene epoxidase and β-(1,3)-D-glucan synthase of T.rubrum and its mechanism. MethodsTreated T.rubrum with EHE, studied the effects of EHE on squalence epoxidase activity in T.rubrum cell membrane by ELISA test and β-1,3-glucan synthase activity in T.rubrum cell wall by fluorospectrophotometry. ResultsThe ELISA test results showed that squalene epoxidase activity was decreased significantly(0.01, vs growth control) in T.rubrum when the concentration of EHE was 256 μg·ml-1. The fluorospectrophotometry test results showed that β-(1,3)-D-glucan synthase activity was decreased significantly in T.rubrum treated with low, middle and high concentrations of EHE(0.01, vs growth control). ConclusionThe antifungal mechanism may be related to its inhibition on squalene epoxidase and β-(1,3)-D-glucan synthase activity in fungus. 　　Key words：Euphorbia humifusa extract; Squalene epoxidase; Elisa test; β-1,3-D-glucan synthase; Fluorospectrophotometry 　　红色毛癣菌T.rubrum是临床常见的皮肤癣菌，也是浅部真菌病的主要病原菌，其中69.5%的皮肤癣菌病是由红色毛癣菌感染所致[1，2]。地锦草Euphorbia humifusa是维吾尔医常用药材，临床主要用于治疗手癣、体癣、足癣、花斑癣及银屑病等[3]。文献报道[48]，地锦草具有显著的抗真菌作用，尤其对毛癣菌属Trichophyton的红色毛癣菌最敏感。为了探讨地锦草提取物抗皮肤癣菌的作用机制，本实验研究了地锦草提取物对红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶活性和β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶的影响，为地锦草的开发利用提供实验依据。 　　1 材料 　　1.1 药物地锦草提取物(EHE，批号，由新疆维吾尔医药研究所药剂室提供，提取方法及质量控制，参照《中华人民共和国药品标准·维吾尔药分册》中百癣夏塔热片之地锦草提取方法及质量控制[9]，用二甲基亚砜(DMSO)溶解制成浓度为102.4 mg·ml-1的储存液，存于-60℃冰箱备用。 　　1.2 菌株红色毛癣菌T.rubrum 1株，菌株编号：XYZ T.r 40001，由新疆医科大学真菌与真菌病研究中心菌种保藏库(XYZ)提供。 　　1.3 试剂RPMI-1640培养基和三氮吗啡琳丙磺酸(MOPS)，