大鼠急性胰腺炎血清中IL6浓度的动态变化_临床医学论文.docVIP

大鼠急性胰腺炎血清中IL浓度的动态变化_临床医学论文 大鼠急性胰腺炎血清中IL浓度的动态变化_临床医学论文 【摘要】 目的： 制作大鼠急性胰腺炎（AP）模型，探讨AP发病过程中血清IL－6与胰腺病理变化及两者之间的关系。方法： SD大鼠随机分为2组，假手术组和AP组，每组30只，用十二指肠闭襻法制作大鼠的AP模型，各组于造模后6、12、24 h分批处死大鼠，用ELISA法检测血清IL同时取胰腺组织进行病理评分。结果： (1)AP组血清IL水平明显高于同时间点假手术组，并随时点延长而升高，0.01；(2)各时间点假手术组的胰腺病理评分均显著低于AP组，0.01；(3)胰腺病理评分与IL浓度呈正相关。结论： IL的升高在AP的发生发展中起重要作用，且与胰腺病理改变的严重程度呈正相关。 【关键词】 胰腺炎 急性坏死性 白细胞介素6 血清学 病理状态 解剖学 急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)是临床内、外科常见的急症之一。病理上分为水肿型和出血坏死型，临床上又分为轻型AP（MAP）和重症急性胰腺炎(severe acute pancretitis,SAP)，大约20%的轻型急性胰腺炎患者会发展成为重症急性胰腺炎，而SAP往往合并严重的并发症及较高的死亡率[1]。AP的发病机制至今尚未完全明了,研究认为,AP 的发生发展与胰酶的异常激活引起胰腺细胞的“自身消化”外，还与细胞因子的过度释放,胰腺微循环障碍,胰腺腺泡细胞坏死及凋亡等诸多机制有关[2，3]。细胞因子等炎症介质启动全身炎症反应,被认为是SAP从局部病变迅速发展为全身性损害的重要因素，越来越多的证据表明，细胞因子在AP的发病过程中发挥着重要的作用[4]。2008年5月～2008年10月,研究大鼠AP不同时期外周血中IL浓度变化及相应的胰腺病理改变,对IL与AP严重程度的相关性进行初步探讨，进一步阐明AP的发病机制。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 动物及分组 健康成年SD大鼠60只（由贵阳医学院实验动物中心提供），雌雄不限，体重为(250±30) g,标准棒状饲料喂养，大鼠随机分为2组，假手术组和AP组，每组30只。 1.1.2 试剂及仪器 EILSA试剂盒(由天津灏阳生物有限公司提供)，全自动酶标仪(Metertech ∑960)，显微镜(OLYMPUS 100)。 1.2 实验方法 1.2.1 动物模型的制备 采用改良十二指肠闭襻法制作AP模型[5]，该模型与人体胆汁返流性AP相类似，手术造成十二指肠腔内压力增高,使胆汁返流入胰管诱发AP。假手术组大鼠开腹后，胃窦部做小切口，并缝合关闭腹腔。麻醉清醒后大鼠可以自由饮水。 1.2.2 观察指标与检测法 两组大鼠分别于术后6、12、24 h分批处死，每批10只，经颈静脉取血2.0 ml，1 500 r/min离心5～10 min，取分离血清-70 ℃保存备用。用酶联免疫吸附法（EILSA）检测血清中IL浓度，检测方法严格按照说明书进行。 1.2.3 胰腺组织的病理检查及评分 各组在规定时间内处死大鼠，肉眼观察胰腺组织的大体病理改变。取胰腺组织用10%甲醛溶液固定，石腊包埋、切片及HE染色，在光镜下观察并盲法病理评分，按Kusske等[6]标准进行病理学分级，分为水肿、出血、坏死及中性粒细胞浸润4项，程度逐项按其正常（0分）至最重（4分），共分为5级，得分越高，胰腺组织的病理改变越重。分级标准见表1。贵阳医学院学报 34卷 2期田 宇等 大鼠急性胰腺炎血清中IL浓度的动态变化表1 胰腺组织病理评分标准 评分水肿出血坏死炎性细胞浸润0无无无无1小叶间灶性水肿实质出血面积lt;25%导管周围坏死lt;5%局限导管内2小叶间弥散性水肿实质出血面积25%～50%灶性坏死5%～20%实质内浸润lt;50%3小叶广泛分隔实质出血面积51%～70%弥散性实质坏死21%～50%实质内浸润51%～75%4全小叶分隔全小叶出血严重小叶丧失gt;50%形成脓肿 1.2.4 统计学处理 以SPSS 11.50软件包进行统计处理，用方差分析及SNK(Staeleat检验，结果表示为均数±标准差（x±s），IL与病理评分的相关性研究用peason分析，P＜0.05有统计学差异。 2 结果 2.1 血清IL组于造模后6 h开始，血清IL含量即升高，并随术后时间的延长逐渐升高，各时间点的IL值均较假手术组明显升高，差异显著（0.01）；AP组6 h、12 h与其24 h相比差异有统计学意义（0.01）,AP组6 h与其12 h相比差异有统计学意义（0.05），见表2。 2.2 胰腺大体病理改变 假手术组各时间点胰腺无明显改变。AP组6 h时胰腺轻度水肿，无腹水渗出；12 h见胰腺明显充血水肿，色泽暗淡；