天花粉蛋白体外抗人白血病和淋巴瘤细胞的作用机制_临床医学论文.docVIP

天花粉蛋白体外抗人白血病和淋巴瘤细胞的作用机制_临床医学论文 天花粉蛋白体外抗人白血病和淋巴瘤细胞的作用机制_临床医学论文 作者：王媛媛，欧阳东云，郑永唐 【摘要】 本研究的目的是探讨天花粉蛋白(TCS)对人白血病和淋巴瘤细胞系的杀伤作用机制。用台盼蓝染色法检测TCS对细胞生长的影响，应用流式细胞术检测TCS诱导细胞凋亡的情况及对细胞生长周期的影响。结果表明：12.5 μg/ml浓度的TCS可以显著抑制各种白血病细胞系的增殖，但对T淋巴细胞系和巨噬细胞细胞系表现为诱导细胞凋亡的作用，而对B淋巴瘤细胞系则表现为生长抑制效应。通过细胞周期检测发现，TCS可以将B淋巴瘤细胞系细胞阻滞在S期，从而抑制细胞增殖，但对T淋巴细胞系则无明显影响。结论：TCS以不同的作用机制杀伤白血病细胞，根据不同的细胞类型分别表现为诱导细胞凋亡和阻滞细胞生长周期的作用。 【关键词】 细胞凋亡 Mechanism of Trichosanthin Against Human Leukemia/Lymphoma Cells In Vitro Abstract The study was aimed to investigate the mechanism of cytotoxic effect of trichosanthin (TCS) on leukemia or lymphoma cell lines. Trypan blue exclusion was used to measure the effect of TCS on cell growth and flow cytometry was used to detect the effects of TCS on cell apoptosis and cell cycle. The results indicated that the TCS could inhibit proliferation of various leukemia/lymphoma cell lines at 12.5 μg/ml concentration, but the effect of TCS on Tlymphocyte and macrophage cell lines showed inducing cell apoptosis and the effect of TCS on B lymphocyte cell line showed inhibiting cell growth. Detection of the cell cycle revealed that TCS could arrest B lymphocytes at S phase, but not had this effect on T lymphocytes at the same condition. It is concluded that TCS can kill leukemia/lymphoma cells through different mechanisms such as inducing cell apoptosis or arresting cell cycle according to cell types. Key words trichosanthin; apoptosis; cell cycle; leukemia; lymphoma 血液系统恶性肿瘤是一类常见病和多发病，发病年龄小，死亡率高，严重危害人类健康。目前的化疗药物存在毒副作用大的弊端，从天然药物中寻找有效的抗肿瘤药物是国内外研究的热点之一。天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)是我国创制的为数不多的一类新药之一［1］。TCS是从葫芦科植物栝楼(trichosanthes kirilowii)球根中提取的一种由247个氨基酸组成的Ⅰ型核糖体灭活蛋白(ribosome inactivating Protein, RIP),具有多种生物学和药学活性，包括免疫抑制作用、中期引产、抗肿瘤及抗病毒作用［2，3］。我们还首次发现TCS具有体外抗白血病和淋巴瘤的作用，并且针对不同的细胞系分别表现为直接杀伤细胞和抑制细胞生长的作用，TCS抗HIV1作用可能与其选择性的细胞毒性有关，但具体机制尚不清楚［4，5］。在本研究中，我们检测了TCS对各种白血病和淋巴瘤细胞系的诱导凋亡的作用及对细胞周期的影响，以期发现TCS抗白血病和淋巴瘤的作用机制，探讨其用于治疗血液肿瘤的可行性。 材料和方法 天花粉蛋白 TCS购自上海金山制药厂，从葫芦科植物栝楼（trichosanthes kirilowii）球根中分离纯化所得。 试剂 台盼蓝购自上海化