小儿增食灵合剂对小儿厌食症动物模型胃蛋白酶活性和胃酸分泌量的影响_临床医学论文.docVIP

小儿增食灵合剂对小儿厌食症动物模型胃蛋白酶活性和胃酸分泌量的影响_临床医学论文 小儿增食灵合剂对小儿厌食症动物模型胃蛋白酶活性和胃酸分泌量的影响_临床医学论文 【摘要】 目的：研究小儿增食灵合剂对实验性幼龄大鼠消化功能的影响。方法：采用病因模拟法建立小儿厌食症动物模型，测定模型动物胃蛋白酶的活性及胃酸含量。结果：小儿增食灵合剂可使胃游离酸和胃总酸分泌量增加，能提高大鼠胃蛋白酶活力,与空白对照组和模型对照组比较，均有统计学意义(0.05或0.01)。结论：小儿增食灵合剂治疗小儿厌食症的作用机制可能与其有效地增加胃游离酸及总酸度、提高胃蛋白酶的活性，从而达到促进消化的作用有关。 【关键词】 小儿增食灵合剂；胃蛋白酶；胃酸：小儿厌食症 小儿厌食症是指食欲减退的一种慢性食欲障碍性疾病，多发于1～6岁小儿，城市发病率高于农村，近年来发病率有增高趋势。以我科张士卿教授治疗小儿厌食症的经验方组方加减的小儿增食灵合剂，通过多年临床观察，具有可靠疗效。为探讨其作用机制，笔者研究了小儿增食灵合剂对厌食症模型大鼠胃蛋白酶活性和胃酸分泌量的影响，现报道如下。 1 材料 1.1 药物及试剂 小儿增食灵合剂由甘肃中医学院附属医院提供，规格：240 mL/瓶；批号：200506；临用时按14.4 g/(kg·d)、7.2 g/(kg·d)分别用蒸馏水配制成相应的水溶液。江中健胃消食片：江中摇曳股份有限公司生产，批号0404003，临用时用蒸馏水制成混悬液，0.576 g/(kg·d)(2 mL)。试剂主要有乙醚、氢氧化钠、盐酸、酚酞、二甲基黄指示剂。 1.2实验动物 选断乳后1周龄的健康SD大鼠50只（甘肃中医学院动物实验中心提供），质量（60±10）g，雌雄各半。合格证书：SCXK（甘）2004－007－0001515。 2方法 2.1动物分组 将50只大鼠适应性喂养1周后，依据数字随机表法分为5组，每组10只。A组：空白对照组。B组：模型对照组。C组：阳性对照组。D组：小儿增食灵合剂小剂量组，简称小剂量组。E组：小儿增食灵合剂大剂量组，简称大剂量组。 2.2模型的建立与给药 所有动物在同一条件下喂养（室温20~24 ℃，相对湿度50 % ）。 A组以常规饲料喂养，其余4组用特制饲料喂养。特制饲料采用鱼肉松、奶粉、玉米粉、黄豆粉、白糖、鲜鸡蛋、鲜肥肉按照1∶1∶1∶2∶1∶1.8∶2比例混匀［1］ ，捏成饼干状，每块约20 g，晾干，4 ℃冷藏备用。所有动物均单笼饲养，自由进食饮水，共饲养5周。每日记录进食量及身体质量的变化，以造模大鼠摄食量平均下降20 %~30 %为模型成功标准,或身体质量低于对照组10 %~15 %为造模成功［2］ 。造模成功1周后，各组开始灌胃。A组和B组每日灌服等体积蒸馏水，D组和E组灌服相应剂量的小儿增食灵合剂水溶液2 mL，C组每日灌服江中健胃消食片混悬液2 mL。各组大鼠均每日灌胃1次，连续灌胃15 d。 2.3标本的采集 所有大鼠禁食禁水48 h，用乙醚麻醉大鼠，备皮，常规消毒皮肤，于剑突下沿腹白线开一2.5 cm切口，提起胃，在幽门与十二指肠结合部用缝线结扎。各组分别于十二指肠注入生理盐水，剂量为0.01 mL/g。缝合创口后放回笼中，术后禁食禁水，5 h后断颈处死动物，取出胃，收集胃液于刻度离心管，以2500 r/min离心15 min，吸取上清液进行胃液分析［3］ 。 2.4检测方法［4-6］ 2.4.1大鼠胃蛋白酶活性的检测 采用Mett法测定胃蛋白酶活性。先用内径2 mm、长10 cm的毛细玻璃管吸满鸡蛋清（纱布过滤），然后放于70 ℃热水中使蛋白凝固，制成蛋白管取出备用（实验当天制备）。准确吸取胃上清液1 mL于试管中，并加入15 mL的盐酸（0.05 mol/L），放进两根蛋白管作为平行样。试管封口后放进37 ℃恒温箱保存，24 h取出两根蛋白管，测量其四端透明部分的长度（mm），求平均值。公式如下： 胃蛋白酶活性单位（U/mL）=四端蛋白管透明部分长度均值2×16 2.4.2大鼠胃酸分泌量的测定 取清晰胃液2 mL，置于小烧杯中，加入二甲基黄指示剂和酚酞指示剂各3滴，混匀，呈樱红色，于小烧杯下衬一白纸。用微量滴定管徐徐滴入0.02 mmol/L NaOH标准溶液，随滴随摇，直至樱红色消失，开始出现橙黄色时，记录NaOH溶液的消耗量，即为游离酸度终点量，继续用0.02 mmol/L NaOH标准溶液滴定，至出现酚酞的红色（微红色不退），记录NaOH溶液的消耗量与上所用之和即为总酸度终点量，按下式计算游离酸和总酸度： 游离酸（mmol/L）=游离酸度终点量×10 总酸度(mmol/L)=总酸度终点量×10 2.5统计学处理 所有数据均采用均数±标准差（±s）表示