冬虫夏草寄主蝙蝠蛾幼虫肠道菌群分析.pdfVIP

第32卷增刊 中国草地学报 2010年7月 V01．32 Chinese of Supp． JournalGrassland Jul．2010 文章编号：1673—5021(2010)t1曾一0063—03 冬虫夏草寄主蝙蝠蛾幼虫肠道菌群分析 马少丽，李玉玲，徐海峰，张宗豪，刘 欣 (青海省畜牧兽医科学院。青海 西宁810016) 摘要：对青海全省分布的冬虫夏草寄主幼虫、人工培养得到的幼虫、天然虫草的肠道菌群进行分离、培养并进行 对比分析试验的结果表明：在所有的肠道中以葡萄球菌属的数量较大，分离频率较高。为优势荫群；在人工培养的幼 虫肠道内没有检出真菌。可能与饲养环境无菌的情况有关；放线菌仅存在于自然采挖的幼虫肠道内。在冬虫夏草和 人工饲养的寄主幼虫的肠道内无未检出。说明在野外的生存环境条件下由于寄主幼虫取食的多样性和杂食性，以及 土壤Ⅸ系微生物的作用。造成自然条件下寄主幼虫肠道内菌群较人工饲养的寄主幼虫的肠道菌群复杂；通过对不同 季节寄主幼虫肠道菌群的分离试验，发现只有在8～11月份的寄主幼虫肠道内能够分离出与冬虫夏草相似的真菌； 添加优势菌群对于人工无菌饲养的寄主幼虫没有根本性的伤害；肠道真菌的存在肘于冬虫夏草的形成具有关键的 作用。该真菌的生物学地位、培养的最佳条件及与冬虫夏草的关系是今后研究的重点方向。 关键词：冬虫夏草；蝙蝠蛾；肠道；微生物；变化 中图分类号：$567．35 文献标识码：A 昆虫肠道中栖息着大量的微生物，它们对寄主 条件下饲养的4～5龄拉脊蝠蛾幼虫(由青海省牧科 产生重要的影响。研究发现，细菌和昆虫寄主之间 院冬虫夏草研究室提供)；试验用冬虫夏草为采挖季 存在着广泛的非致病关系，包括互利的关系，甚至有 节在冬虫夏草产区拉脊山收购的新鲜冬虫夏草。 些细菌是昆虫寄主生长发育、繁殖所必需Ⅲ。昆虫 1．2培养基 肠道系统是伴随取食、消化、排泄等活动而多变的环 培养细菌用万能培养摹和普通培养基，培养真 境，其中寄居的微生物与昆虫的营养生理活动有着 密切的关系，一方面其群落结构、代谢活动受到昆虫 基，放线菌采用高氏(Gause)培养基，霉菌用查氏 肠道微环境影响，另一方面它们也影响着昆虫的生 (Czapek)培养基，各种培养基均按周德庆和陈天寿 命活动。肠道微生物对宿主具有营养、免疫、生物刺 介绍的方法配制。以上培养基均可做成平板，进行 激、生物拮抗等作用，是机体的生理组成部分12j。 涂布接种用阳“]。 1．3试验用具 sinensis)是我国青藏高 冬虫夏草(Cordyceps 原特产的传统名贵中药，近年来由于野生资源遭到 灭菌试管，灭菌平皿，灭菌lml、10ml吸管，灭 严重的破坏，再加上市场需求的逐渐增大，冬虫夏草 菌乳钵，灭菌蒸馏水，生理盐水，无菌刮菌铲。 已远远不能满足市场的需求。为解决这个矛盾，从 1．4幼虫的解剖 20世纪70年代末期，已经有十余家科研院所开始 用细线将蝠蛾幼虫头尾分别系紧，用无菌水和 对冬虫夏草的人工培育进行研究，其中青海省畜牧 75％酒精清洁幼虫体表，并用75％酒精浸泡3min 兽医科学院跻身于研究的前列，并于1998年获得了体表消毒；无菌条件下解剖幼虫，取其肠道．加入 一根完整的全人工培养的冬虫夏草，随后研究重心 1ml无菌水匀浆，迅速将匀浆液按10倍梯度稀释至 转移到如何提高冬虫夏草侵染率问题上。要解决这 10一。 个问题，首先就是要有优质的菌种和幼虫虫源用于 1．5接种培养 试验，以及寻找并发现虫草菌入侵幼虫体的关键环