实验动物绿脓杆菌的检测方法研究.pdfVIP

第3l卷第2期 实验动物科学 Vol_3lNO．2 2014年4月 LABORATORYANIMALSCIENCE 2014 April 妒移移驴驴婶 §研究报告§ 易、沪、：彝争、‘盔争《蚕》圆 实验动物绿脓杆菌的检测方法研究丰 郭 辉 王翠娥 彭 冈4 高雪靖 王雪妹 刘 博 车路平 王小珂 卢胜明 (北京维通利华实验动物技术有限公司，北京100107) 摘要：目的研究和建立实验动物及环境样品绿脓杆菌(Pseudomonasaeruginosa)快速、准确的鉴定方法。方法分 别用VITEK2Compact全自动分析系统和常规生化方法对绿脓杆菌参考菌株、绿脓杆菌分离株和恶臭假单胞菌分 离株进行鉴定试验，并比较不同鉴别培养基的鉴定效果。结果 可以用PIA琼脂培养基／CFC琼脂培养基和乙酰 胺琼脂培养基为鉴定培养基，采用以氧化酶、明胶液化和42℃生长试验为主的常规鉴定方法，也可采用VITEK2 VITEK2 Compact全自动微生物分析系统直接鉴定绿脓杆菌或将其用于常规鉴定结果的确认。结论 Compact全自 动微生物分析系统适于绿脓杆菌快速、准确的鉴定或用于对常规鉴定结果的确认。 关键词：绿脓杆菌；VITEK2 Compact全自动微生物分析系统；实验动物 文献标识码：A 文章编号：1006—6179(2014)02-0013-03 中图分类号：Q95—337 绿脓杆菌(Pseudomonas 1．1．2主要试剂：VITEK2Compact革兰氏阴性GN aeruginosa)又称铜绿假 单胞杆菌，属于假单胞菌属，革兰氏阴性杆菌，有运 鉴定卡购自生物梅里埃中国有限公司。 动性，菌体一端有一根鞭毛，无芽孢。其广泛存在于 NAC增菌液、微量生化反应管购自杭州天和微 环境、实验动物的饮水设施及实验动物的皮肤、呼吸 生物试剂有限公司；NAC琼脂培养基、乙酰胺琼脂 道和肠道，是实验动物常见的一种条件性致病菌。 培养基、假单胞杆菌分离(PIA)琼脂培养基、CFC琼 绿脓杆菌是SPF级实验动物必须排除的病原菌之 脂培养基、营养琼脂培养基购自北京陆桥技术责任 一。参照GB／T14926．17—2001实验动物绿脓杆菌有限公司。以上鉴定卡、试剂和培养基均在有效期 检测方法¨o使用微量生化管对绿脓杆菌进行鉴定 内使用。 时，检测过程繁琐、费时，且易出现假阳性或假阴性 1．1．3主要仪器：VITEK2 Compact全自动微生物 的结果。本文通过比较不同培养基的分离效果，并 分析仪(法国生物梅里埃公司)，电热恒温培养箱 对常规生化方法和VITEK2 (三洋科技有限公司)，生物安全柜(Healforce)。 Compact全自动微生物 分析系统鉴定方法二者对绿脓杆菌的检测结果进行 1．2实验方法 分析比较，以找出更适用于实验动物绿脓杆菌的准 1．2．1鉴别培养基特异性比较：将绿脓杆菌参考菌 确、快速的鉴定方法。 株以及43株样品可疑分离株分别接种于NAC增菌 液中复苏，然后划线接种于NAC琼脂培养基、乙酰 1材料和方法 胺琼脂培养基、假单胞杆菌分离(PIA)琼脂培养基