水-聚丙二醇两相体系中生物转化法合成2-苯乙醇.pdfVIP

第11卷第5期 过程工程学报 、，01．1lNo．5 2011年10月 TheChineseJoumalofProcess Oct，20ll Engineering 水一聚丙二醇两相体系中生物转化法合成2一苯乙醇 陈虹， 陈蔚青， 张建芬 (浙江树人大学生物与环境工程学院，浙江杭州310015) 摘要：研究了水一聚丙二醇两相体系中生物转化法合成2．苯乙醇的工艺条件，考察了聚丙二醇分子量、加量、转化 振荡转速和底物浓度对2．苯乙醇合成的影响，确定了最佳的转化条件．结果表明，摇瓶中两相体系转化合成2一苯乙醇 的最佳条件为；聚丙二醇分子量1 r／rain，底物浓度13 L发酵 500，加量为培养基体积的l／2，振荡转速250 g，L．在5 罐中采用水一聚丙二醇两相体系生物转化法合成2．苯乙醇，浓度达6．87 g／L，产率为0．38g／(L．h)，较常规水相转化分 别提高了42．2％和58．3％． 关键词：2．苯乙醇；生物转化；两相体系；聚丙二醇 文献标识码：A 中图分类号：TQ920．6；Q815 文章编号：1009-606X(2011)05-0782—04 ， *．} 2一苯乙醇的产率，并在此基础上进行了5L发酵罐的转 一 “。 ” 化实验，获得了理想的2．苯乙醇合成浓度和产率． 2材料与方法1_，ll-了川。“ Ⅲ．妻髦誓慧黧2煮三黧：：釜篙1蜘,2-，PE某)是7 以L．苯丙氨酸为前体，利用酵母细胞将其转化为2．苯乙 醇．若以发酵法或酶法生产的L．苯丙氨酸为底物，按欧 2．1菌种和试剂 美国家的法规，生物转化法生产的2一苯乙醇可标称天然 酿酒酵母(Saccharomyces 产品，该技术具有广阔的开发应用前景【l-31．生物转化过 江工业大学药学院生物制药研究所提供．L．苯丙氨酸购 程中，产物2．苯乙醇对酵母细胞有一定毒性，达到一定 自浙江康普达生物科技有限公司，纯度99．5％；2．苯乙 浓度后会抑制细胞生长，产物浓度难以通过工艺优化得 醇购自Sigma公司，纯度98．O％；聚丙二醇购自国药集 以提高【4】．降低2．苯乙醇对酵母细胞毒性的一个有效方 团化学试剂有限公司，化学纯；其他试剂为市售分析纯、 s／tuProduct 法是采用原位产物分离技术(In Recovery,色谱纯或生物试剂． 2．2主要仪器 ISPR)，在转化过程中及时将培养基中的2．苯乙醇分离， 从而降低其对细胞生长的抑制．原位产物分离技术有多HWY2102恒温振荡摇床(上海智城分析仪器制造 种，如有机溶剂萃取法、固相吸附法、双水相萃取法和 有限公司)，TDL一5C高速离心机(上海安亭科学仪器公 C02超临界萃取法掣51，这些技术应用于2．苯乙醇的转司)，LC．20AD高效液相色谱仪(日本岛津仪器有限公 化合成各有利弊，有机溶剂萃取法较有优势，可显著提 司)，KF．5L发酵罐(韩国高百特发酵机株式会社)． 高2．苯乙醇的产率，工业化应用的可行性较高．有机溶 2．3培养基 剂萃取法使用的溶剂多为油酸，加入油酸虽能显著提高 斜面培养基组成(g／L)：葡萄糖lO，蛋白胨5，酵母 2．苯乙醇的产率【¨】，但2．苯乙醇在油酸和水体系中的 粉3，琼脂20；种子培养基组成(g／L)：葡萄糖40，蛋 分配系数小