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石油艨制与记二 生物法处理钻井废弃液的研究 崔靖园，李辉，牟伯中 (华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室应用化学研究所，上海200237) 摘要 GC／MS分析平湖油田钻井废弃液含有烃类、酸类和酯类等23种有机污染物质。16s rRNA基因文库分子生物学方法测得的微生物生态多样性表明，废弃液中微生物种类丰富，包括丫 和p变形杆菌细菌，其中7-Proteobacteria是优势闲群，占克隆总数的78．6％。从废弃液中分离得 到了一株石油烃降解菌，对废弃液有良好降解效果，COD和TOC去除率在50％以上，经鉴定该 marcescens。 菌是Serratia 关键词：钻井废弃液16SrRNA基因烃降解菌生物修复 1前言 供了科学保障。通过分析钻井废弃液中污染情况 钻井废弃液是石油天然气开采工业中主要污 和微生物群落组成，并根据微生物群落结构特点 染物之一，是一种含黏七、钻屑、各种化学处理剂、 提出有针对性地修复对策和治理方案是本研究的 污水及污油的稳定悬浮体系，其成分复杂，石油烃 思路。本课题首先运用Gc／Ms方法分析了东海 类等有机物往往超标。钻井废弃液如果任意排放 平湖油田钻井废弃液中有机物污染情况，然后采 或者处理不当都会直接或间接对环境造成危害， 用16SrRNA基因系统发育方法对微生物群落结 因此寻找切实可行的钻井废弃液无害化处理方 构进行研究，最后，在全面了解样品中微生物多样 法，成为各大油田亟待解决的课题。以往钻井废 性的基础上，将从废弃液中分离得到的烃降解菌 弃液的处理方法主要有化学絮凝、固化、焚烧、脱 加入到废弃液样品中，检测对废弃液有机污染物 稳干化等化学和物理方法，这些方法要么处理费 的去除效果。 用高、处理不彻底，要么会产生二次污染。而生物 2实验 法处理钻井废弃液具有成本低、效率高、不会产生 2．1样品性质分析 二次污染等优点，成为目前最有效的处理方法，而 钻井废弃液取自东海平湖油田八角亭B01 微生物修复技术是生物法中最重要、最核心的组 号井，采集后4℃储存。COD(化学需氧量)测 成部分。 定采用重铬酸盐法(GB／T11914—1989)；BOD。 在钻井废弃液的微生物修复技术中，无论是 (生化需氧量)和TOC(总有机碳)分别按照GB／T 生物絮凝法(废弃液中加入微生物使高分子有机 7488—1987和GB／T13193—1991方法测定。氯 物絮凝并且沉积下来)、还是生物降解法(废弃液 代十六烷做为内标，用正己烷多次萃取废弃液中 中加入微生物使有机长链烃或者有机高分子降解 成为环境可接受的低分子或气体)，关键是筛选得 中有机成分组成及含量。 到合适的微生物菌种。与外源微生物相比，本源 2．2 DNA提取及PCR扩增 微生物能更快地适应废弃液环境。因此，本源微 细菌基因组DNA提取参考Zhou抽提环境 生物在钻井废弃液的微生物修复技术中有潜在应 用价值。在实施微生物修复之前，分析和研究废 收稿日期：2010-05．17：修改稿收到日期：2010—08·30。 弃液中微生物的生态多样性十分必要。现代分子 作者简介：崔靖园(1983一)，男，硕士，生物化学专业，从事石油 污染环境的微生物修复研究J二作。 生物学技术促进了人们对废弃液中微生物群落结 基金项目：圉家自然科学