海水养殖鱼类弧菌病与其免疫学研究.pdfVIP

海水养殖鱼类弧菌病及其免疫学研究 吴灶和’吴后波2叶剑敏2李 凌2 (1.湛江海洋大学，广东湛江，524088 2.中国科学院南海海洋研究所，广东广州，510301) 遨国自20世纪80年代初期开展海水鱼类网箱养殖以来，由于高密度集约化养殖所带来 的多种负因子影响，其病害种类、发病频率及其危害性亦逐年增加，其中弧菌病是海水鱼类 养殖过程中主要病害之=，严重时死亡率可高达70%一8096，甚至全部死亡，造成巨大的 经济损失。本文 介绍 者十几年来对华南地区海水养殖鱼类弧菌病研究的结幻 1 南海养殖 类弧 病及其流行情况 石斑鱼、笛绷演疡症:由溶燕弧菌感染所引起，主要发生在养殖的赤点石斑鱼和红鳍笛 绷.在鱼种阶段和养成阶段均有流行，但以10一15公分的鱼种最为敏感。主要症状是外表 皮肤出现大小不等的溃疡面，严重感染个体，溃疡可深达肌肉，内脏可见脾脏肿大，肝脏色 泽偏淡，不论从体表演疡部位或肝、脾、肾均能分离到病原菌。该病在华南地区常年均有流 行，死亡率在50%左右，最高可达9096, 石斑鱼烂月烂尾病:由创伤弧菌引起，主要发生在青石斑鱼，主要症状是鳍条出现溃 烂，特别是尾峪，绷条基部出血，突眼，眼睛水晶体混浊，内脏可见脾脏肿大。该病在华南 地区主要流行于5-功月，死亡率在50%左右。 真门演疡症由最小弧菌感染引起。发病初期的真纲游动缓慢，游泳无力，经常游出水 面，振食t降低或不摄食;随着病程的加重，体表幼片脱落，表皮溃疡严重时债疡面深达肌 肉。内脏点状出血。肝脏明显缺血，有的地方出现旅血，呈花斑状。该病主要危容真翻鱼种 阶段，50--100g鱼级易感染，死亡率在50%以上。 尖吻护弧菌病:由河流弧苗生物z型所引起。该病主要流行于低沮季节，·由于尖吻妒为 热带性鱼类，低沮季节引起休表冻伤，继发细苗感染而致病。症状是，体表出现演疡，幼条 末端演烂，游动迟饨。该脚t-旦矛发，死亡串超过5096a ‘ 2真润弧菌病的病理特征 . 对真门弧蔺病的组积病理及血液病理研究发砚，病鱼血浦各项生化指标中，钾离子以及 尿素撅、乳胶脱氮醉 (LDH)、谷丙转奴醉 (GPT)、谷草转抓辞 (以刀、)等指标均非常显 著地高于健康鱼，而佑萄褚与总蛋白含t则明显低于健康鱼，钠离子与级离子虽然高于健康 鱼，但并不显着。病鱼红细胞明显减少，而白细自明显增多。在三种白细胞中，咐中性白细 胞数f减少，琳巴细胞的数f增多，，单核细胞的数All化不大。 病鱼肝细胞空泡变性，线位体数且减少.峪变烦或断砚且排玛有乱。脾脏巨曦细胞增 多，胶原纤维增多，局部纤维化，有的地方箱健变性劣琳巴细饱的核固缩，造血组织遭到破 坏。肾脏的肾小管上皮细胞混浊肿肤，内含大小不等的空泡。肾实质中造血组织严重损伤， 肾小管上皮细胞游离面刷状缘纤毛排列紊乱、断裂，有的萎缩消失。骨胳肌肌束排列紊乱， 肌纤维肿胀，有的明显死亡，胶原产物和疏松结缔组织成分明显增多，局部发生玻璃样变 性。心肌的肌纤维排列紊乱，部分坏死，肌细胞线粒体峭断裂、消失且排列紊乱，并呈绒团 样变性和空泡变性。由此推测真绷受病原菌感染致病后，不仅产生皮肤溃烂等炎症反应，而 且肝、脾、肾等内部功能器官也发生相应的病变，鱼体机能代谢紊乱，导致血清电解质产生 病变.从而引发尿毒症和贫血症的产生，最终加速鱼体死亡。 3真绷病原最小弧菌外毒素的特性 最小弧菌产生的外毒素经硫酸按沉淀、DEAE一纤维素层析及Sephadex-G100层析进 行纯化。对纯化毒素的各种特性进行了分析，该毒素具有以下特点:(1)提纯毒素经2一琉 基乙醇处理，作SDS一PAGE电泳，获得一条带，说明该毒素为单一的多肚，不具备典型的 细菌毒素的A,B亚基结构，用该法测得其分子量为30.456KDo(2)氨基酸组分分析的结 果表明该蛋白天冬氨酸的含量最多，半胧氨酸的含At最少。(3)该毒素对真胭、小白鼠等具 较强毒性，LD5,!分别为4.48ug和3.17pgo(4)在%孔板上分析该毒素的溶血谱，发现该 毒素能溶解许多动物的红细胞，其中对鲤科鱼类、缝鱼等的溶血性最强，对蛇、牛的溶血性 次之，对绵羊、山羊的溶血性最弱。(5)用Vero细胞测其细胞毒作用，发现该毒素能引起 V二细胞病变，使细胞变圆、脱落，具较强的细胞毒作用。参照病毒TCID05滴定方法，计 算出毒素对Vero细胞的。与，值为0.48pgo(6)提纯