肺癌胸膜转移性胸水TIL的细胞毒活性的研究.pdfVIP

大会交蠢 肺癌胸膜转移性胸水TIL的细胞毒活性研究 吴昌平，蒋敬庭，邓海峰，吴骏，孙文辉，陈国瑾，吴爱珍 (苏州大学附属第三医院肿瘤生物诊疗中心，常州213003) 摘 要 目的：了解肺癌胸膜转移的胸水中的胂瘤漫润淋巴细胞(TIL)细胞毒活性．方法：采用不连续密 度离心法提取肺癌胸膜转移的胸水中的肿瘤浸润淋巴细胞和相应的肿瘤细胞．经过一定时问诱导堵养后．在7 天、14天、2l天和28天分别检测nL对自身肿瘤细胞和K562细胞的细胞毒活性．结果：11L对自身肿瘤细胞 和K562细胞的细胞毒活性差异无显著性。三周时细胞毒活性最强．绪论：临床可在T几诱导培养三周时进行 临床应用，并可取得最佳疗效． 肺癌是危害人类健康的主要恶性肿瘤之一，居恶性肿瘤死亡率的第一位，肺癌患者约15％伴有胸腔 infiltration 积液，晚期可达50％．本室曾采用流式细胞术分析了胸水肿瘤浸润淋巴细胞(Tumor 满意的疗效。本室又分析了25例肺癌胸膜转移性胸水中的TIL对自身肿瘤细胞和K562细胞毒活性．旨 在更好地选择具有最佳细胞毒活性的TIL用于治疗肺癌胸膜转移引起的转移性胸腔积液。 l材料和方法 1．1入选病例与标准 25例均为肺癌胸膜转移性癌性胸水患者，年龄58～72岁。25例均经细胞学诊断为癌性胸水，胸水量 中等以上，同肘胸水中均找到肿瘤细胞。由X线胸片及胸部B超观察胸水量的改变，均未接受癌性胸水的 其他常规治疗．预计生存期3个月． 1．2实验材料与诱导方法 RPMl 面上的细胞悬液，即得到TIL缨跑，用含有AB血清和IL．2的RPMI1640培养液调整细胞浓度为1．0× 106／“。收集相应的肿瘤细胞内加入含10％小牛血清RPMl1640液中置含5％的o。2、37℃温箱中培 养，隔天加入倍量相应的培养液中诱导培养。 1．3细胞毒活性测定 胞(人红自血病细胞株，由中科院上海细胞所提供．)用生长液调整细胞浓度为1．0×105／ml作为靶细胞。 效靶比均取lO：1．96孔反应板加入效应细胞和靶细胞各100ul／孔，同时设靶细胞、效应细胞及空白对照 时，均取上清液150ul／孔，再加入DM50150ul／孔．以溶解形成的色素颗粒，采用SLTⅢ型酶标仪在 570nm波长下比色。 实验组A值一效应细胞对照组A值 结果计算T1L活性=(，一塞堕组{墨翕毒舞嚣学譬产)×-oo％ 2结果 细胞毒活性与肿瘤的发生、发展及转移呈负相关，是判断机体抗肿瘤水平和促进癌性胸水吸牧标志之 ·113· 江苏省抗癌协会化疗专业委贝会第五届年会论文汇编 一．经检测胸水TIL对自身肿瘤细胞和K562细胞毒活性发现，在三周时具有较高的细胞毒活性(均P 0．05)，但TII。对自身肿瘤细胞和K562细胞毒活性两者之间差异无显著性(P0．05)。结果见附表。 辩囊1IL细稳在不同时镯对自身辨囊缅胞稻K562钓缀戆毒活性变化％) 洼：t检验．-P0．05，--P0．05 3讨论 肿瘤浸润淋巴细胞是继LAK细胞免疫疗法之后的更具特异性的新疗法，其疗效已得到临床证实。 而癌性胸水中的淋巴细胞是一种特殊形式TIL细胞，它能充分识别肿瘤细胞后杀伤肿瘤细胞，其细胞毒 活性对癌性胸水的吸收与疾病的恢复有密切的关系，同时TIL细胞毒活性测定也是评价所制备的TIL细 胞生物物性的重要指标。 本文Z5例肺癌胸膜转移性癌性胸水患者分别在提取胸水TIL同时分离出自身肿瘤细胞，分别进行 诱导培养，在7天、14天、21天、28天时检测其对自体肿瘤细胞及K562细胞的细胞毒活性。在三周时 TIL对自身肿瘤细胞及K562细胞的杀伤活性最强，细胞毒活性与培养时闻存在蓍一定的关系。但TIL 对自身肿瘤细胞和K562细胞的细胞毒活性差异无显著性，提示实验室可直接采用K562细胞作为靶细胞 来检测TIL细胞毒活性。由此可见，在进行三周培养后的肿瘤浸润淋巴细胞可达到最佳杀伤胸腔内转移 的肿瘤细胞的能力，TIL主要分布在胂瘤与正常组织的交界处及肿瘤组织