酵母生物转化同时生产S-腺苷-L-蛋氨酸与谷胱甘肽的研究.pdfVIP

酵母生物转化同时生产S一腺昔-L一蛋氨酸和 谷肤甘肤的研究 刘惠 林建平 岑沛霖 (浙江大学玉泉校区生物工程与化学工程学系生物工程研究所，杭州 310027 摘要 研究确定了利用培养24小时后的啤酒酵母补加前体蛋氛酸和破源荀萄枪生产S-膝普一L-蛋 氛故 (AdoMet)的转化策略，以蛋氮酸为前体生产 AdoMet同时还可以得到高水平的胞内谷脱甘肤 (GSH)。啤酒醉母转化过程对pH歌感，AdoMet和GSH产物合成的最适初始PH分别为5.0以及6.0. GSH水平在AdoMet的快速合成阶段由于对ATP的竞争消耗而受g，抑制，高溶氧对AdoMet产物的积双 速度、产圣和提离蛋氛酸的转化率有利。当蛋氛酸前体添1mti为tgil时，啤酒酵母中胞内AdoMet和 GSH的积东蚤可分别达到80mgtgDCW和1.0%以上。 关.词 5一旅芬一L一蛋获嫂 啤酒酵母 谷脱甘肤 蛋衷酸 S一腺昔-L-蛋氨酸 (S-adenosyl-L-methionine，简称AdoMet,SAM或SAM-e)，是一种 生物体内广泛存在的小分子，分子结构如图1所示川。AdoMet在细胞内是由AdoMet合成酶催化 得到的.如方程 (1)所示。 AdoMet合成井 methionine+ATP S一adenosyI一L一methionine (1) ， 桃 AdoMet参与体内约35种以上的重要生化反 夕 人 产 应fx,nl，对关节病疗效显著，是一种有效的抗抑郁 L 药，外源S-腺昔一L一蛋氨酸的摄人还会提高肝 从 脏内谷胧甘肤 (GSH)的水平，使肝损伤明显消 解 n 1，H 除，利于各种肝病的恢复川。 AdoMet又是谷胧甘肚 (GSH)的代谢前体i4.5 肝脏内外源AdoMet的加人时曾观察到GSH水平的 提高’}‘。GSH是一种重要的三肤，在体内发挥着重 要的功能，临床上用于解毒。 图IS-碑普一L一资奴胜结构:高能锐离子的 近年来AdoMet和GSH的工业化生产受到了广 存在使得相邻碳建在亲核进攻下肠于断裂 泛关注。生产方法主要有酶法]’[和微生物转化 Fig.I MolecularstructureofS-adenosyl一L一 法[7,8J等。在微生物转化法中，一般都采用酵母体 n能比inn卜，.:Presenceofthehigheneryg 系，但是，几乎在所有的研究工作中，AdoMet和 如.activateseachofthe attachedcarbonstowardsnucleo呻ueattack. GSH的生产都是分开进行的。 本文将对几种酵母产AdoMet能力进行筛选， 并将重点考察以蛋氨酸为前体生产AdoMet的过程中是否同时伴有GSH的积累，并对转化过程中 酵母细胞同时生产两种产品的过程特性和可行性进行研究。 1 材料和方法 I.I 菌种 毕赤酵母 (Pichiastipitis)、产阮假丝酵母 (CandidaUtilis)、啤酒酵母 (Sacchammycescerevisi- ae)、面包酵母 (Baker，Yeast)由本实验室保藏，菌种保存在斜面培养基上，4℃储藏，每三个月 转接一次。 1.2