荧光法初步筛选氨基甲酸酯类农药生物毒性地研究.pdfVIP

第二届全国环境化学学术报告会论文集 荧光法初步筛选氨基甲酸酯类农药生物毒性的研究。 孙荚+ 张立佥 饶震红 闵顺耕 中国农业大学理学院，农业部农药化学与应用技术重点开放实验室，北京100094 ， 摘要：{对三种氨基甲酸酯类农药化合物与离体小牛胸腺ctDNA的相互作用进行了研究．结果发现，三种 农药化合物畸ctDNA存在嵌插柞甩：三种氧基甲酸酯类农药化合物与ctDNA的作用常数与其毒性具有 ＼ 对应关系．这种方法与文献所述的其它测试方法相比较具有一定的理论基础并且简单易行·) DNA；荧光粹灭；生物毒性；相关性 关键词：氨基甲酸酯类农药；Ct 0 前言 通过作用于乙酰胆碱酯酶，氨基甲酸酯类农药化合物可以阻断生物的神经信号传导而 引起其死亡，所以药物的作用靶标是乙酰胆碱酯酶蛋白。而从理论上来看，所有的酶和受 体蛋白质都是从DNA经转录、翻译等过程产生的，所以核酸应是药物作用于生物体时的 更重要的生物靶标…。 虽然生物的离体实验相对于活体实验具有一定的差异，但实验己经证明如果化学物质 对离体DNA的作用具有一定的作用，那么这些化学物质对活体DNA也应具有一定的作用 效果㈦。而林辉祥等通过DNA的离体实验对钯铂抗癌配合物的生物活性研究，结果证明实 验药物在生物体内的活性与通过DNA所进行的离体活性具有一致性，所以生物离体实验 可以考虑用于药物活性的快速筛选”1。 百威(carbofuran)。 1 实验部分 1 1仪器与试剂： DNA，ct 日立F-4500荧光分光光度计。小牛胸腺DNA(calf DNA)配成溶液的 thymus 浓度为250 u咖l，其纯度A260／A2∞=1．99；乙霉威、甲萘威与克百威溶液的浓度分别配为 20 ug／ml、10 ug／ml与50uedml,缓冲溶液用EDTA-Tris；实验所用水都为二次蒸馏水。 1．2实验方法 ‘通讯联系人，Tel：01062892496，E—mail：sunybj@sina．corn． 。1，农业部农药化学与应用技术重点开放实验室资金赞助2，北京市重大自然科学基金项I|(No8000001) 5硼莎∽ ／ 第二届全国环境化学学术报告会论文集 向数只支lOml的比色管中各加入2ml的乙霉威、甲蔡威以及克百威溶液而分成三组， DNA溶液，最后用水定 然后每组各比色管都加入1mlTris．EDTA缓冲溶液与不同体积的ct 容至刻度线，各溶液在2012，30C，37C下进行水浴加热，分别测定各溶液不同温度条件 下的荧光强度。 2结果与讨论 关系(见表1)： 表1不同温度下三种药物与ctDNA作用常数 Table．1The ofthree at function withCt DNAdifferent quenching pesticidesinteracting temperature 因剩 a_乙霉威diethofencarb c．克百威carbofuran b．甲萘威carbary The ofc