曲利本蓝分光光度法测定新霉素地研究.pdfVIP

曲利本蓝分光光度法测定新霉素的研究 江虹1，刘绍璞2，胡小莉2，湛海粼3 (1涪陵师范学院化学系，重庆408000；2西南师范大学环境化学研究所，重庆400715； 3涪陵广播电视大学，重庆408000) 摘要：曲利本蓝(TB)与新霉素0qEO)在pH2．肛7．0的条件下反应生成蓝色离子缔合物．最大显色波长位于 ug／ml(褪色法)．若用双波长叠加法测定， 法)L．tool-I,cm．’；线性范围分别是o~16．0¨g／ml(显色法)和0--13．0 10(L·mol-1cm一．本文研究了适宜的反应条件及主要的分析化学性质。方法用于实际样 则￡值可达3．79X 品的测定，结果满意． 关键词t 曲利本蓝 新霉素 分光光度法 新霉索0qEO)属氨基糖苷类抗生素，在临床1．2实验方法 上有其重要作用。近来测定新霉素的分光光度 于10ml比色管中，依次加入2．00m11．0× 1．t 104mol／L的TB溶液，一定量的20．0 法，主要是利用金属离子或有机试剂与其发生显 g／ml(或 色反应进行测定Il“。本文利用酸性双偶氮染料 40．0ug／m1)的硫酸新霉素标准溶液，1．0mlpH5．0 曲利本蓝fiB)光度法测定新霉素，迄今未见报的BR缓冲溶液，用水稀释至刻度，摇匀，10rain 后在最大吸收波长或最大褪色波长处用lcm液 道。研究发现，曲利本蓝(1B)与硫酸新霉素0qZO) 反应后，发生明显的颜色变化，并出现明显的显 池，以试剂空白为参比测其吸光度。 色峰和褪色峰。其最大显色波长位于680nm，线2结果与讨论 u 2．1吸收光谱 性范围为0-16．0g／ml，摩尔吸光系数(￡)为 9．15x103L·mol“·cm～：最大褪色波长位于 u 588nm，线性范围0-13．0 g／ml，摩尔吸光系数 (￡)为2．87X104L·tool一·cm～。若采用双波长 叠加法测定，其￡值可提高至3．79× l矿L·mol。·cm一。故采用显色法、褪色法或双 波长叠加法测定，灵敏度均较高。选择性、稳定 性均好，操作简便快速。该法用于实际样品的测 定，结果满意。 1实验部分 1．1主要仪器与试剂 UV．8500型紫外一可见分光光度计(天荧公 司，香港)；722型光栅分光光度计(四川仪表九 图1TEl．硫酸新霉素离子缔合物的吸收光谱 厂)。 1试剂空白；2NEO．水参比i3113·NEO(IOral)； 4TB-NEO(20ral)；5TB-NEO(30m1)；6TB-NEO(4Oral) 曲利本蓝(Trypanblue，TB；Chrom公司)溶 OX 液：储备液浓度1．0×103mol／L，操作液浓度1．03西试剂空白作参比：TB：l104tool／L；NEO：2．0 u 0 ×1旷mol／L。硫酸新霉索(NeomyeinSulphate， g，ml；pH5 按实验方法配制溶液后，于Uv．8500型紫 NEO；Sigma公司)标准溶液：储备液浓度400．0 p la u g／ml,