亲合毛细管电泳研究环糊精和芳香羧酸的相互作用.pdfVIP

亲合毛细管电泳研究环糊精与芳香羧酸的相互作用 傅崇岗q赵艳芳1刘爱林1王立新2 (聊城大学1化学化工学院，2教育技术系，聊城252059) 包结常数是描述主体与客体之间特异性相互作用最主要的参数，目前常用的测定方法有 电位法、极谱法、光度法、高效液相色谱法等，但这些方法分别存在测定精度不高，需要高 纯度受体与配体，用量比较大或繁琐费时等缺点。 毛细管电泳(cE)是一种高效、快速分离的新技术。用它研究主体客体的相互作用有如 下优点：所需样品量少(pg级)；对主体的纯度要求不高；可以同时研究多种客体与一种主体 的包结行为；有多种模式可供选择；测定速度快，准确性好等。本文基于亲合毛细管电泳和 峰漂移模型，同时测定了苯甲酸、苯乙酸、邻羟基苯甲酸与p一环糊精的包结常数，首次利用 毛细管电泳法研究了温度对包结常数的影响。 1实验部分 1．1仪器与试剂 Beckman P／ACE 永年光导纤维厂)内径75肿，总长47cm，有效长度40cm。所用试剂均为分析纯。 1．2实验方法 NaOH、 加入不同浓度的D—CD；样品溶液由运行缓冲溶液配制，压力进样2s。进样前用0．1M 蒸馏水和电泳缓冲液各冲洗1分钟，每个样品连续运行三次，丙酮为电渗流标记物。用液冷 方法控制毛细管柱至所需温度。SystemGold软件控制仪器操作并采集数据(采集频率5Hz)。 非线性拟合程序基于Marquardt算法用Matlab语言自编。 2结果与讨论 2．1芳香羧酸与环糊精的包结常数 随着D—CD浓度的改变，三种芳香羧酸迁移时间也相应改变，引起这种变化的原因有两个， 一个是相互作用引起迁移时间的变化；另一个是溶液粘度引起的变化。采用电泳电流校正法¨1 消除粘度的影响。拟合淌度--[CD]线求得包结常数列于表l。 表l 三种芳香羧酸酸与p-CD的包结常数(25℃) ’本文系山东省青年科学基金(Q99811)和教育部“高等学校骨干教师资助计划”项目 204 当p—CD浓度增大时，三种酸的出峰顺序也随之改变。这种变化主要取决于主体分子与客体分 子形成包结物的难易与稳定性。由表1可看出苯乙酸的包结常数大于苯甲酸，因为苯乙酸比 苯甲酸多一个皿甲基，其疏水性增加，苯环可以更深的嵌入[3-CD的空腔。从而增大了所形成 包合物的稳定性。而羟基苯甲酸的包结常数远大于苯甲酸和苯乙酸．因为在羟基苯甲酸分子 中，苯环上的羟基可以与环糊精边缘的羟基形成氢键，这种氢键作用在超分子化合物的形成 中中起主导作用。可以预见在分子大小适当的情况下，增加羟基的数目将有利于B-CD对该分 子的包合。 2．2芳香羧酸与p-CD包结反应的热力学参数 在2030℃的温度范围内，研究了温度对芳香羧酸与p-CD包结反应平衡常数的影响．发 现随温度的增加，三种酸的包结常数均变小。以lgK对lIT作图，得到包结反应的各种热力 学参数(表2)。由表2可知，熵因素和焓因素对△G所起的作用相反，其焓、熵互补现象明 显，这种补偿关系的微观本质可以从分子间作用力和分子运动自由度两方面来解释。一方面， 芳香羧酸的苯环部分呈疏水性，更易嵌入环糊精内部疏水的空腔内，其包结反应为放热反应； 另一方面，两种分子形成超分子包合物后，受分子间力的制约，主、客体分子运动自由度均 减小，因此熵减小。△G值的大小综合反映了熵变和焓变对主客体包结反应影响的总结果，它 可作为主客体分子间包结难易的一个判据。 表2 三种芳香酸与p-co包结反应的焓变、熵变及吉布斯自由能变 References 2． Y’J．Phys．Chem．B1997，101：87～100 Rekha墙hyM．V，MayhewM．P．，GoldbelgR．N．，RossP．D，．YamashojY,Inoue 3．№n H。zimmermann 53 K．L．，EndoT，Veda W，CarbolgMIr．Res．1998，309：1 205