鼠妇中镇痛物质的提取与其镇痛研究.pdfVIP

鼠妇中镇痛物质的提取及其镇痛研究 孙凤英刘艳李微朱凯田晓乐膝利荣· (吉林大学生命科学学院130012) 攮要：采用水提法提取鼠妇，将水提物经凝胶过滤、离子交换层析后，从焙干鼠妇分离得到了一种多肽，腹腔注 和小鼠跳跃实验测鼠妇水提物的成瘾性，生理盐水作为空白组，吗啡组作为阳性组。结果表明，新鲜鼠妇水提物 分离纯化得到等电点为6．2的组分，皮下注射镇痛实验有镇痛作用。用药组镇痛效率分别为83．2％，40．1％，未 出现竖尾和跳跃现象。说明鼠妇水提物有明显的镇痛作用，在实验剂量的范围内投有成瘾性。 ‘关键词1镇痛作用；成瘾性；小肄；竖蛋；跳跃曩?， 鼠妇主要含蛋白质、蚁酸，具有解毒止痛、破血利水作用Ⅲ。国内曾有报道Ⅲ，将鼠妇用于 肝癌晚期的止痛，作用持久性优于杜冷丁，并经动物实验证实。近年来，人们通过现代药理研究 为鼠妇的一些临床疗效提供了依据，但是研究深度与广度尚不够，一些经临床证实的疗效还未有 理论支持。若能对鼠妇的有效成分进行更深入的药理活性研究，很可能会开发出大有希望的新药。 本文从焙干鼠妇中分离纯化得到一种多肽类物质，并对其理化性质、药理活性进行了初步研究， 为进一步开发鼠妇中高活性药物提供依据。 1材料与方法 小型板式过滤器(美国)。 18-229昆明小鼠，雌雄各半由吉林大学生命科学学院实验中心提供。吗啡10mg／ml／支，由 沈阳第一制药厂生产，批号：040306。生理盐水0．9％，由内蒙古康源药业提供，批号：030819。 盐酸纳洛酮注射液0．4mg／ml／3￡，由北京四环医药科技股份有限公司提供。其它试剂均为分析纯 或生化试剂。 2实验方法 2．1 鼠妇多肽的分离纯化鼠妇水提物的制各：1009新鲜鼠妇．用研钵研碎，加入5倍体积的 过截留分子量10000Da的超滤膜，取滤液于60(2旋转蒸发浓缩得鼠妇水提物，4C冰箱保存。 212 (pH=6．2)。 流动相：蒸馏水。 2．2鼠妇多歇镇痛活性测定降” ml 100只小鼠随机分成10组，空白组背部皮下注射(sc．)0．3 性检验)。 2．3小鼠竖尾实验测成瘾性时1选用40只小鼠分为四组．每组10只，分别皮下注射吗啡(15 15rain．观察小鼠是否出现竖尾和不停的走动现象。 2．4小鼠跳跃实验测成瘾性¨1 选用40只小鼠分为四组，每组lO只，每12h皮下注射吗啡 催瘾，立即把小鼠放在高35 数。 3结果与讨论 3．1 G．25柱层析后，得到2个组分I，iI(见 鼠妇多肽的纯化鼠妇多肽的粗分离：Sephadex 图1)。 Elution of G一25 profile chromatograrn Fig．1 Sephadex 3．2小鼠醋酸扭体镇痛实验鼠妇水提物，皮下注射镇痛实验表明鼠妇水提物原液有镇痛作用， 并且镇痛效果随注射剂量的不同呈明显的梯度变化，表现出了药量依赖性关系(见表1)。DEAE。52 219 纤维素柱层析吸附的蛋白经Sephadex G-25柱层析后得到2个峰，都有镇痛作用，而且第二个组 分作用强(见表2)。 表1鼠妇水提物原液的小鼠醋酸扭体镇痛实验 {+p0．0l有显著性差异+p0．05有差异 表2组分1和组分2的小鼠醋酸扭体镇痛实验 ++p0．01有显著性差异·p0．05有差异 2．3 小鼠竖尾实验测成瘾性 本实验使用剂量范围内未见到鼠妇水提物有成瘾性(见表3)。 TableThe 3 test tail-erecting 2．4小鼠跳跃实验测成瘾性