有机磷水解酶的表达和纯化.pdfVIP

第九章 环境保护相关领域研究进展 有机磷水解酶的表达和纯化 谭烽12兰文升1 杨超1 江红1 陈雯莉2 乔传令1 (1．中国科学院动物研究所农业虫害鼠害综合治理国家重点实验室北京 100101； 2．华中农业大学农业微生物学国家重点实验室 湖北 武汉430070) 摘要从有机磷降解菌株YC一1中克隆出了有机磷水解酶基因mpd，成功构建了融合蛋白MPH的 表达载体pETM，并构建了大肠杆菌基因工程菌，在lIxM的IPTG，25。C诱导，能够高效表达MPH， 经SDS—PAGE凝胶电泳验证为有机磷水解酶MPH。进行了酶活性的测定，表明该蛋白具有较高活 性。对MPH进行了分离纯化，SDS—PAGE电泳和酶活性的测定验证了MPH纯蛋白，比活力为 5525．9／g蛋白。MPH纯蛋白广泛用于Ft常食用瓜果蔬菜的预处理中，并为生物传感器的应用奠定了 基础。 关键词有机磷水解酶表达纯化 伴随着现代农业的快速发展，农药在消灭害虫、提高农作物产量和质量中发挥着不可估量的 作用。使用化学农药是最重要的农作物保护手段。有机磷农药是世界上使用量最大的农药之一， 占到全球销售量的34％和全球