α粒子诱发人支气管上皮细胞恶性转化后的DNA修复基因表达谱的研究.pdfVIP

毒理学角度出发，Z24有可能作为一种全新机制的抗癌新药进一步研发。 Q粒子诱发人支气管上皮细胞恶性转化后的 DNA修复基因表达谱研究 隋建丽1，孙敬芬1，范保星2，周平坤1，吴德昌1 1．军事医学科学院放射医学研究所放射毒理研究室，北京市100850；2．解放 军301医院呼吸内科，北京市100853 肺癌是我国常见恶性肿瘤，近年来大量的流行病学调查分析表明肺癌除与 吸烟有关外，居室或环境氡辐射的暴露也是人支气管肺癌的一个重要的环境诱 因。我国云南的云锡矿高氡暴露环境下作业矿工的肺癌发病和死亡显著增加。氡 暴露与肺癌发生的密切关系已被揭示，辐射诱导肺癌发生的分子机制也受到重 视。 DNA损伤修复是生物体系中高度进化保守的生化代谢系统，在维系生物体的 遗传或基因组稳定性中发挥重要作用。针对不同的损伤类型，细胞有DNA损伤的 直接修复、碱基切除修复、核营酸切除修复、链断裂修复、错配修复等多种修复 机制。DNA修复缺陷将导致细胞的基因组不稳定性，促使细胞功能衰退或增加细 胞的恶性转化风险性。本研究采用DNA修复基因专门芯片，研究辐射诱发人支气 管上皮细胞恶性转化细胞模型中DNA修复基因表达谱的变化。 研究采用的基因芯片共含有320个基因，其中DNA修复相关基因126个。用 Cy5和Cy3分别标记的癌变细胞BERP35T4和亲本细胞BEP2DcDNA作为探针与芯 表达谱差异。由于应用的芯片分成3个区域，重复点样，即每个基因在一张芯片 上至少有3个以上点，一次杂交可获得3组重复数据，实验结果表明，3个区域 有很好的重复性。通过分析散点图中位于45。角直线上点的 的蒸圆表达无差异，远赛纛线的点(比值0。5或2。O)考虑为差异表达基 因。结果袭明有i0个修笈基因的表达受剜抑制，包括DNA链断裂修复基因 lING、 blot 杂交和半定摄RT—PCR对部分表达麓异基因进行了验证，获得了与芯片检测一致 的缩果。 总之，袈疆射暴露致赫癌的分予学基础舄氡及其子体发射的a粒子能诱发支 气管上皮细胞的DNA损伤点接相关。DNA修复机制缺陷，将导致细胞基因组不稳 定缝，增鸯羹瓣瘗发生麴最羧蛙． DNA-PKcs在入支气管上皮细胞恶性转化系和肺癌组织中的异常表达 孙敬芬，障建嚣，簧珍出，羼平坶，吴德基 军潦医学科学院放射医学研究所放射毒理研究室jb京100850 DNA依赖蛋白激酶(DNAdependentproteinkinase。DNA-PK)是由3个亚 基组成静彝源复合体，邵两个小的调节亚基Ku70籁Ku80籀一个大的罐纯驻基 DNA—PKcs(460 自激酶，属予同一窳族的功能蛋白还有A硼、ATR蛋白等，这些蛋白在细胞基因 组稳定性中发挥耋爨捧羼。DNA-PK娆识别粒传递DNA凝裂援伤馕号，参毒DNA 链断裂修复反应。DNA—PKcs在维护端粒稳定性、V(D)J重组中也发挥重要作用。 有缀遂曼暴，人镩蔗鬻缝织稷耱癯绣织串豹DNA菝羧蛋鑫激辩豹表达努毒愚不鹭 一的，这些研究一方面为揭示DNA—PK广泛的生理功能提供依据，另一方面也有 韵谖剐组织缅施对放射或DNA损伤药物酌敏感性。由于DNA-PKcs其有丝氨酸／ 苏氨酸激酶活性，研究其在癌变细胞或组织中的表达和功能状况、以及与辨癃鳃 胞的生物掌特性关系等具有踅要意义。本研究探讨了仅粒子辐射诱发的人支气管 上皮缎魅癌变系及麟痉组织孛DNA-PKes的表达耪激酶活性戆变纯娥掺。 Western blot分析结果表明，Ⅱ粒子辐射诱发人支气管上皮癌变细胞