分泌表达PR39重组AAV对缺氧鸡胚促血管生成的研究.pdfVIP

虽然育不断增加盼神经斑管交互压迫引起动眼神经症状的报告，是否可以仅凭MRI所见神经血 管的密切关系而做出病因诊断?有作者质疑这种血管神经交互压迫的征象是颅神经症状的真正病因， Mollor等认为盘管豹嚣追可能是引起神经症状诸多病因之一，丽菲惟一的覆爨，盘繁压迫霹能触发或 加重了本身存在的基础病因而表现出相应的神经症状。上述观点的主要论据是在无症状人群中存在血 管神经交互压迫征象。 关予动眼神经，Zhang等报道的一组资料中，140倒光症状人群中有19倒(13。6哟表现出神经受 压征象，Uz等对15例尸体头颅的研究中也发现动眼神经背侧与大脑后动脉的Pl段和P2段存在紧密 接触现象。本研究结果提示，动鼹神经赫池段与邻近动脉血管相接融是一种常见的MPd征象，发生 率达到53。8％，有18．8％的动眼神经受到邻近动脉血管的压迫却不出现任何动眼神经症状。在接触或 压迫动眼神经脑池段的动脉血管中，大脑后动脉最常见，其后依次是小脑上动脉、后交通动脉，颈内 动脉和基赢动脉灵ll菲常少见。 老年人血管的迁曲、延长及扩张将可能增加接触或压迫神经的几率，然顽，本组研究结果却并未 显示这种年龄与神经血管比邻关系的相关性，在年轻的入群中，也可见到血管神经交互压迫现象。 MPd显示动眼挣经脑池段与邻近动脉接触或压迫征象在正常无症状人群枣具有较高懿发生率，并 且这种征象与年龄无明确相关关系。作者认为目前尚不能仪凭MRI所见动眼神经与邻近血管接触或 受敷管压追西做出动旅神经麻痹的病因诊断。 分泌表达PR39重组丸W对缺氧鸡胚 促血管生成的研究 西安，第四军医大学西京医院放射科(710032)郝跃文孙立军划莹 大量实验与临床研究证明基因工程技术具有明显促缺血心肌血管新生、改善局部血流灌注及受损 心功能恢复等俸用，鬣往研究仅仅局限予单一VEGF或bFGF促趣管新生作用，而缺少对其上游调控 基因的研究。VEGF基因长期无限铡高表达，造成体循环中VEGF持续升高，弓l起血管癯等副作用， 给基因治疗带来很大障碍。 Vincent等入提出第二代盘管源经匿子及治疗性转基毽霹增强2个戏多个莆盘篱生成的绥飚活素 因予，PR39被喻为“血管生成的总开关”，Li等研究证明，外源性PR39选择性抑制泛素一蛋白酶体对 HIF一1旺表达及促低氧环境鸡胚尿膜囊血管生成。 资料与方法 一、菌株、厦粒、工具酶、维脆及壳隆载体 供。生物酶均购皇莲安华美生物工程公霹。低氧(1％Ch)缨戆壤养箱盘第四军医大学基础部病理教 146 研室提供。 二、构建融和基因NT4-弘■His-PR39表达盒 l。NT4-TAT-His-PR39酶设计强i穿膜肽羧基溃震GCCGGCGT和NT4信号敢连接，内切酶 用Nae I。6xHis标签直接和TAT融合，目的基因PR39通过Eco 得NT4一TAT．His-PR39表达盒。 弓|物由上海生物王程技术赧务有限公司合成。咒囊Rl正反链互菇模板，先进行PCR扩增PR39 得PR39全序列，将PR39连入pGEM．TEasy质粒。 3．pBV220／NT4．TAT．His．PR39载体构建Ec0721与BamHI联合酶切消化pGEM．T／PR39，切 HI联合酶 送往上海生工生物工程技术服务有限公司基因测序。 三、AAV携带融合基因NT4．TAT-His-PR39载体构建 Eco HEK．293细胞，按照参考文献8方法进行，圈收纯化重组AAV。 四、免疫缨魏纯学溅定ECV304中6xHis及强F。l程蛋盘表达 3Axl09 l∞Ill 化学测定6xHis在ECV304内表达情况，间接证实PR39在胞内表达。 理方法弱蘸，溅察低氧嚣境ECV304孛珏lRl镊蛋自表达情况。 分别将每张HIF-la和6xHis蛋白免疫细胞化学结果的数码显微照片随机分为五个视野(倍数为 水平。 五、鸡题的割备 30只鸡胍(50-55 g，表面无污染，无破损。天数为lO 3x109 在CAM上加loopl 5％02低氧环境孵弯7 缀。数码相机搠摄CAM新生赢管，使用IPP软件