毛细管电泳-安培检测法同时测定普鲁卡因与普鲁卡因胺的研究.pdfVIP

广西师范大学学报(自然科学版) 2003年10月 V01．21No．3 JOURNAl。OFGUANGXINORMAI．UNlVERSITY 毛细管电泳一安培检测法同时测定普鲁 卡因及普鲁卡因胺的研究 吴晓苹1，廖文榕1，段建平2，陈红青2，陈国南” (1．福州大学化学系．福建榀州350002；2．福州大学中心实验室，福建福州350002) 到高度重视‘“．毛细管电泳电化学检测(CE EC)与通常所使用的光检测法相比，具有灵敏度高、检测限 低、检测器制作简便等优点，尤其是对具有电活性的物质的分离检测具有不可比拟的优越性。1]．普鲁卡 因及普鲁卡因胺同属芳胺类药物，结构相似，本文主要建立用HPCE AD分离测定普鲁卡因及普鲁卡因胺 的方法，并将其用于模拟血清样品的分离、检测，获得了较为满意的效果． 1实验部分 1．1仪器与试剂 自制的高效毛细管电泳一电化学检测装置，组件包括0--30kV无级可调高压电源(上 海原子核研究所)，石英毛细管(圣20!am×60 LC 4C型安培检测器(BioanalyticalSystem，West 极，铂对电极，Ag／AgCI参比电极)，BAS 鲁卡因胺(购自Sigma公司)，配置成标准液(1．0×10 纯以上试剂．所有的溶液在测定前用0．22,am滤膜过滤．实验用水为Milli—Q超纯水． 1．2实验方法每次实验前，更换新鲜的电泳运行液，在毛细管两端接上分离电压，分别经碱洗、水洗、缓 冲液洗，30min后体系进入稳定状态．每运行5次后，毛细管先以0．1 用Milli—Q超纯水洗3min，最后用电泳运行液使其平衡稳定7min．实验采用电动进样，条件为18kV电 压下进样10 mol／ V． I．，分离电压18kV，检测电位+1．1 2结果与讨论 2．1 电极工作电位的选择 实验选用1．1V为最佳工作电位，此时信噪比最大．电位继续增加峰高仍随 之增加，但伴随基线不稳，噪音明显变大，信噪比降低，所以本文选择1．1V为最佳工作电位． 五2电泳介质疑分离电压的影响 檬酸斗}檬酸三钠、柠檬酸NazHPO．、乙酸乙酸钠、HCI CE 离，所以选择pH4．8为缓冲液酸度．我们考察了缓冲液浓度在10～40 度的影响，实验发现碡待测物的迁移时问及分离度都随缓冲液浓度的增加而加大，综合考虑分离时间及分 基金项目：福建省自然科学基金资助项目(D0110005)；教育部重点基金资助项目 第21卷 广西师范大学学报(自然科学版) 二肌一 8 9 10 II 12 3 14 15 ，，mIn 图1标准样品电泳分离谱图 2．4工作曲线、检测限及精密度在上述最佳实验条件下，测得的工作曲线，及检测限如表1 表1 工作曲线、检测限殛精密度结果 分析物 线性检测范围(mol／L) 工作曲线回归方程 Rz 检测下限(moI／L) 5×10～l×10。 515 4 8 普鲁卡因 y--1 5z+1．018 0．9922 1．6×10 普鲁卡因胺 5×10～1×