十二烷基键合氧化锆填充CEC柱地研究.pdfVIP

IN-004 十二烷基键合氧化锆填充CEC柱的研究 张庆合张凌怡张维冰李彤张玉奎 (大连化学物理研究所国家色谱分析研究中心大连11601I) 1前言 毛细管电色谱(CEC)是近年新兴起的一种高效分离分析方法”。31，主要有填充柱、开 管柱和整体柱三种柱模式，由于填充柱毛细管电色谱柱可以通过改变固定相及流动相满足大 u 多数样品分离分析的需求，得到了最广泛的应用，其中粒径3 m或5um的多孔oDS反相HPLC 固定相以其柱效高、应用范围广等特点使其在cEc实际应用中最为广泛。作为CEc固定相， 要求固定相表面存在一定量硅醇基以保证足够的电渗流，而残留硅羟基可能对部分化合物的 保留产生一定的影响；另外，cEc中为保证足够的电渗流同时抑制碱性化合物的解离，希望 在较高pH值流动相条件下进行分离，而硅胶基质在大于pH8时开始溶解。 90年代以来，ziO。基质肝Lc固定相以其耐酸耐碱性能好、表面性质独特等优势引起色 谱工作者的关注。本文以自制十二烷基键合氧化锆微球作为CEC固定相，制备填充毛细管电 色谱柱，考察了其色谱性能并与十二烷基硅胶键合固定相进行了比较。 2实验部分(略) 3结果与讨论 3．1流动相pH值和有机改性剂浓度对电渗流的影响 固定流动相乙腈与缓冲溶液的体积比为60／40，改变pH值，根据硫脲的洗脱时间计算 电渗流，在相同条件下也对十二烷基键合硅胶固定相填充柱进行了实验，结果表明，随流动 相pH值升高，两CEC柱上电渗流相应增大，在C12一ZrOz柱中，pH值高于5时电渗流基本趋 于恒定，而在C12一ZrO。柱中，电渗流增大的趋势非常明显。填充C12一zr02固定相CEC柱中 cEc柱，这是由于氧化锆固定相表面吸附结合的磷酸根离子 电渗流明显高于填充C12-Si02 的作用。在较低pH值条件下，由于硅胶基质键合固定相CEC中电渗流较小，影响分离进行， 而键合氧化锆固定相填充CEC柱在宽pH范围均能够提供足够的电渗流满足分离的要求。 试验考察了键合氧化锆固定相电渗流与流动相有机改性剂浓度的关系，发现电渗流基 本不随流动相乙腈浓度改变而变化。在磷酸盐缓冲体系中流动相乙腈含量40％到80％范围内， 一般不会产生气泡，重现性良好。而采用乙酸盐缓冲溶液流动相体系时，气泡出现的几率相 对较大，CEC柱的稳定性变差。 3．2固定相的稳定性 分别在不同pH值的流动相条件下运行lOh后将流动相换为乙腈／5moi．L～pH6．74的 PO；3缓冲溶液(60／40，v／v)，以N，N’一二甲基苯胺和葸作为溶质进行实验，检测固定相 的稳定性，结果表明在pH3一ii．7范围内，溶质的容量因子基本恒定，表明固定相具有极好 的稳定性。 3．3有机改性剂和pH值对化合物保留值的影响 固定流动相pH值为6，改变流动相中有机溶剂含量，考察苯胺衍生物与稠环芳烃保留 值的变化情况，随流动相中乙腈含量提高，溶质的保留减小，并且k’值与乙腈浓度之间存 在良好的线性关系，相关系数在0．99以上，说明固定相的反相保留机理。碱性化合物的k’ 值随流动相pH值增大有～定提高，而稠环芳烃类中性化合物的容量因子没有明显的变化。 3．4C12-Zr02 CEC柱分离中性化合物 得到均匀填充电色谱柱床是保证实现高效稳定电色谱分离的关键，但是由于氧化锆比 重较大，作为CEC固定相时，填充均匀的电色谱柱比较难，加快填充速度、减少封口烧结时 间等方面改进后能够得到高效、稳定的色谱柱床，图1是稠环芳烃化合物的电色谱分离图， 其中葸的理论塔板数可达到12万／m，与烷基键合硅胶基质固定相的柱效接近。 3．5 C12-Zr02CEC柱分离碱性化合物 图2比较了苯胺衍生物在C12一zr砚和C12一Si02CEC柱上的电色谱分离图，可以看出， 碱性化合物在C12-Zr02CEC柱上得到很好的分离，色谱峰的对称性也非常理想，而在c12一 Si02CEC柱上，苯胺衍生物的色谱峰都存在一定程度的拖尾。分离吡啶混合物也有同样现象， 进一步表明了C12-ZrO：固定相在碱性化合物分离方面的优势。 1 8