微分脉冲伏安法用于尿样中N6-甲基腺苷的研究和测定.pdfVIP

广西师范大学学报(自然科学版) 2003年10月 OFGUANGXINORMALUNIVERSITY JOURNAL 微分脉冲伏安法用于尿样中N6一甲基 腺苷的研究与测定 杨娟，张兰。，陈江，陈国南 (福州大学化学系．福建福州350002) N6一甲基腺苷(N6 尿液和血清中含量高于正常人，可以作为肿瘤诊断的标志物之一，因此N6一甲基腺苷的分析检测对恶性肿 瘤的早期诊断和治疗有重要的临床价值和意义“。．已报道的尿中核苷的检测方法有：免疫分析法、气相色 谱法、高效液相色谱法和毛细管电泳法”～o．免疫分析法特异性差，且放免法要接触同位素，有一定的危险 性；气相色谱法需要衍生，操作繁琐；高效液相色谱法虽灵敏、特异，但柱平衡、分析时间长(一个尿样需 2h左右)．毛细管电泳法仪器成本高，灵敏度较低．本文采用简便灵敏的微分脉冲伏安法实现了模拟尿样 中N6一甲基腺苷的快速测定，结果良好．同时还应用多种电化学方法对N6一甲基腺苷的电化学氧化机理进 行了初步的探讨． 1 实验部分 1．1实验仪器与试剂 BAS 100A(BioanalyliealSystem，Purdue，IN，USA)电化学分析仪． N6甲基腺苷(购自sigma公司)标准液(1．010～3 样(健康人)加适量N6-MI。储备液、摇匀、振荡、离心，吸取清液0．5ml。，加入缓冲液定容至10ml，．所有 试剂均为分析纯以上．水为二次蒸馏水． I．2实验方法 0．9～1．5V电位范围进行微分脉冲伏安(DPV)扫描． 2结果讨论 2．1支持电解质的选择 MI，均可产生一 体系、柠檬酸缓冲体系、柠檬酸钠缓冲体系、草酸钠缓冲体系)的DPV行为．结果表明．N6 个不可逆氧化峰(pH5．oo时峰电位1．26 冲液作为测定介质． 2 2 pH值的选择 在不同酸度的BR缓冲溶液中测定N6 4．95～5．10范围内时，N6。甲基腺苷的峰电流达到最大且相对较稳定，若偏离此范围，刚峰电流迅速降低， 选择pH5．00为最佳酸度条件． 基金项目：教育部博士后基金资助项目(XJBH一0i02)；福州大学博士后基金资助项目 第21卷 广西师范大学学报(自然科学版) 2．3体系稳定性 室温下至少可以稳定4．5h左右，5h以后峰电流开始缓慢减小．因此在4．5h内为最佳测定时间．在实验 过程中将暂时不用的药品放在冰箱中冷藏，减缓降解程度． 2．4干扰测定 对尿样中可能与N6一ML共存的生物物质和离子进行干扰试验．结果表明，大量葡萄糖、尿酸、丙氨 酸、zn”，Ba”，Na+，K+和CI对测量基本无影响，因此该体系完全可适用于尿样测定． 2．5线性范围与检测限 内呈现良好的线性关系(尺一0．9981)，检测限为：5．0×10mol／I。．标样平行5次测定的相对标准偏差 RSD为0．5％(”一5)． 2．6样品测定 分别对3份处理过的尿样进行含量分析和回收率测定实验．结果见表1．用本法测得的模拟尿样RSD 检测． 表1模拟样品测定结果 2．7伏安峰性质 本文采用循环伏安法、线性扫描伏安法等电化学技术研究了N6MI。伏安峰的性质，结果表明在 系可知，电极过程主要受扩散控制，电荷转移系数“一0．5．电极反应为4H+，4e一的不可逆氧化过程． 参考文献 F，RussoT．ColonnaA，eta1．CancerDetectPrey，1983．6：531． [1]Salvatore [2]ltohK，KonnoT．SasakiT．etal CllnChlmAeta，1992，206：／81 ra TⅢa1．ClinChimActa．1986，154：125． [3]TamuS．FujiiJ．Nakano [4]MaaudaM，NishihinaT．ItohK．etal Cancer．1993，72：3571 HM，Xu