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（） 中国生物防治学报 年 月
!O ! !++ 2 !/ N;6AEA a?57 Z G6786(57 N)?7 !## ,
用于土壤中生防芽孢杆菌!# 和!$% 检测的
’() 标记及其特异性
，
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耿文义 ，郭荣君 ，李世东 ，许修宏
（ 中国农业科学院植物保护研究所 农业部生物防治重点开放实验室，北京 ； 东北农业大学农业资源与环境学院，哈尔滨 ）
#C D #1# ! C #,+
摘要：生防芽孢杆菌!#$%%’ EFF = 菌株G% 和GH# 对引发多种根腐病的真菌具有拮抗作用，研发特异性标
记是研究该菌株在土壤中生态行为的关键。本研究采用 个 随机引物对 和 以及包括芽孢
#% IJKL G% GH#
杆菌、鞘氨醇杆菌 和假单胞菌 在内的 株参试菌株的基因组 多态性
()*$+,-’$+. EFF = /’.0-1-+’ EFF = !, LMJ
进行了分析，其中利用单引物G#0 和N# 可分别扩增到仅出现于G% 和GH# 基因图谱中的特异性条带（大
小分别为O+PF 和%,1PF ）。为提高扩增的特异性和稳定性，根据G% 和GH# 的IJKL 标记中核苷酸序列分
别设计了 对和 对引物并用于菌株特异性条带的筛选，从中挑选出 对特异性最好的引物转化为
% #! ! QNJI
引物，命名为QNJI$G% 和QNJI$GH#，扩增产物大小分别为,!+PF 和%,1PF 。在自然土中进一步验证QNJI
标记的特异性，结果表明仅在加有菌株G% 或GH# 的土壤样品中可扩增到相应的QNJI 条带，说明了这种
以KNI 为基础的方法可用于土壤中菌株G% 和GH# 的快速鉴别。
关 键 词： 分子标记； 分子标记；芽孢杆菌；生物防治
QNJI IJKL
中图分类号： ； 文献标识码： 文章编号： （ ）
Q/1! C!0! R0+0 C # J #,$0!%# !## !$!++$1
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