体外诱导生物被膜肺炎克雷伯杆菌产β-内酰胺酶.pdfVIP

Preventive 实用预防医学2011年1月第18卷第1期Pr∞tical Medicine．J蚰．20ll，vol18，No．1 149 文章编号：l006—3llO(2011)0l一0149一03 体外诱导生物被膜肺炎克雷伯杆菌产B一内酰胺酶 徐丹1。吴小宁2 摘要： 目的 了解诱导8一内酰胺酶的产生情况，探讨生物被膜(BF)克雷伯杆菌耐药机制，为临床选用抗生素提 供理论依据。 方法 应用改良平板培养法建立肺炎克雷伯杆菌BF模型，用银染法和扫描电镜观察鉴定；分别检测浮 p一内酰胺酶的能力；采用改良三维试验法检测AmpC酶和Nitroc商n纸片扩散法检测EsBh。结果 产酶菌株BF组 比浮游菌组要多，美罗培南(c组)诱导BF组产酶率最高，其次是头孢吡肟(D组)，氨曲南(E组)最低；在活性检测中B组 胺酶的活性明显降低(P0．05)，B组产8一内酰胺酶的活性是E组的1．03倍。结论BF的形成和产生ESBL及 AmpC酶的协同作用是肺炎克雷伯杆菌耐药的主要原因之一。 关键词：生物被膜；肺炎兜雷伯杆菌；p一内酰胺酶 中图分类号：R378 文献标识码：B 作者单位：l湖南省长沙市第一医院(湖南长沙410005)；2长沙市第四医院 作者简介：徐丹(1964一)，女，副主任检验师．主要从事医学临床检验工作。 16旭／ml。 在一般情况下，在一定范围内。接种的菌量越大，药物的抗菌效 结果发现在沙氏培养基 果往往就越差。如很多研究者在做中药抗丝状真菌实验时，直 2．2培养基pH对MIC值的影响 中，pH为3时其MIc值为32剧“，pH为5时其MIc值为8接从菌种中取一小块菌块接种到含药培养基中。这样，不同研 剧ml，pH为8时在最高药物浓度的条件下白色念珠菌也能很究者取的菌块大小差别较大，甚至同一研究者在同一批实验 好的生长。 中，在不同的试管中接种的菌量也不一样，这就会影响中药抗 2．3接种真茵浓度时MIC值的影响结果见表l。 真菌实验结果的准确性。这也可能是对同一种药物，不同研究 裹l 接种真菌浓度对MI【’值的影响结果 者所得的结果不一致的主要原因【4】。AmB具有较强的抗白色 念珠菌的作用，其抗白色念珠菌的活性依赖于所选择的实验条 件，体外MIc决定于培养基的种类、培养基的pH值、接种菌 量、血清的加入量、培养时间、氧气的含量等。在改良沙氏培养 3讨论 培养基的种类及其pH、接种真菌浓度对抗真菌药物在试 效果降低；抑菌活性有pH依赖性，在低pH时，药物的MIc较 管内的抗真菌活性影响很大拉J。如氟康唑在低pH时活性可降 低，在高pH时，药物的MIc显著升高。多年来，抗真菌药物敏 感试验方法不统一，与体内药效不完全一致，以致发展缓慢。 低1000倍。甚至同一种培养基．由于pH不同。其抗菌活性也 不一样【3j。因此，国外在研究抗生素和化学合成药物的抗真菌 美国国家临床实验室标准委员会的抗真菌药物敏感性试验专 活性时，对使用的培养基种类及其pH非常重视，常选用不同的 培养基和把同一种培养基调整成不同的pH进行研究。国内绝 CLS)，酵母菌液体培养摹稀释法抗真菌药物敏感性实验的参考 大多数研究者只用沙氏培养基，对培养基的pH也没有进行调 方法．用于规范药物敏感性实验的方法，从而使所得的实验结 整．所以可能影响某些药物的抗真菌效果。pH的不同可能是 果更加町信．更加有利于指导临床用药。 [参考文献] 药物在两种不同培养基中的MIc不同的原因之一。在不同的 实验中，实验条件不尽相同．需要接种与积累的菌量不同。所 】5】．