人白血病细胞染色体缺失片段谱地研究.pdfVIP

慢性中性粒细胞白血病合并多发性骨髓瘤一例 浙江大学医学院附属二院血液科朱蕾卢兴国 患者男，66岁，农民。因发现白细胞升高一年余，当地医院经多种抗生素治疗无效，疑为 慢性粒细胞性白血瘸，后骨痛腹胀一月．脾大，肋下约10cm，来我院门诊做骨髓穿刺检查。在 1～65．4X 10’几，中性90％·99％，淋巴 当地共做过13次血常规，白细胞(WBC)持续升高为29 =o．59，碱性磷酸酶．2669t几，v．谷氨酰转肤酶81 u几，血尿素氮21．5mg／dI，血尿酸13．74mg／dl， 2-球蛋 1一球蛋白2．5％(0．2Wd0，o C．反应蛋白10．2mg／dl。生化电泳中自蛋白43．3％0．619／d1)；o 白5 5％， 计数：中性晚幼粒4％，杆状核30％，分叶62％，淋巴4％。骨髓涂片分类计数：原始粒细胞0 早幼粒2．o％，中幼粒5o％，晚幼粒6．o％，杆状核22．5％，分叶26％，嗜酸细胞o．5％，早幼红 细胞I．0％，中幼红35％，晚幼红40％，淋巴5．0％，单核2．0％，原幼浆细胞20．0％，浆细胞2．0％。 粒红比7．4：1。全片巨核细胞10只。外铁染色阴性。中性粒细胞碱性磷酸酶阳性率98％，积分 383分。骨髓特征描述：有核细胞增生活跃．为中性粒细胞和浆细胞两个系列显著异常。前者以 杆状分叶核细胞为主，多见空泡和毒性颗粒(附图1-2)．且NAP积分显著增高(附图3)；后者 原幼浆细胞占浆细胞900／0以上，同时有异形性。红系造血差，巨核细胞尚可，骨髓诊断：造血 系恶性肿瘤：1、多发性骨髓瘤(MM)；2、慢性嗜中性粒细胞白血病(CNL)。由于病人经济条 件较差．未入院治疗。讨论：MM是由于单克隆浆细胞恶性增生并分泌大量单克隆免疫球蛋白引 起的一种恶性肿瘤疾患；CNL是属于慢性骨髓增殖性疾病，也是～种恶性肿瘤疾患。前者主要 表现为骨痛，血沉，球蛋白高，肾功能受损等。后者主要表现为脾肿大，外周血自细胞持续增高， 毗成熟中性粒细胞为主．中性粒细胞碱性磷酸酶阳性增高等。这些指征在本例患者身上均有体现。 此患者首先是发现外周血白细胞持续增高，中性粒细胞占90％以上，自起病至确诊己14个月。 血液学检查和生化检查尿酸增高等均符合CNL诊断．但经抗生素治疗无效。行骨髓穿刺检查后 发现其浆细胞也异常增生，生化学和免疫学检查又符合MM的诊断。MM和CNL两者都是血液 系统恶性肿瘤，各自发病率均较低(特别是CNL)，而两种肿瘤合并在一起更是罕见。这两种疾 病发病有无必然联系，作者尚未见报道。 人白血病细胞染色体缺失片段谱的研究 浙江大学医学院附属第二医院血液科 徐荣臻许晓华吴东童杰峰徐根波张晓红赵小英 近年来的一些研究表明：人白血病细胞常常发生染色体片段缺失。由于其中的一些缺失困引 起相关肿瘤抑制基围的灭活而被认为与白血病的发生和发展有关。然而，由于缺少合适的研究技 术和方法，迄今还无法明确人自血病细胞有多少染色体发生缺失、缺失的染色体片段涉及到哪些 重要基因?本研究设计了一种新的研究策略对人白血病细胞染色体缺失片段谱进行系统鉴定。本 研究簧略的基本原理是利用在高浓度的氯化钠和蛋白变性剂环境中，高分子量的人基因组DNA 比小分子量的染色体缺失片段优先在低温高速离心中沉淀。大致技术路线是：首先，用Hirt氏 DNA法分离和纯化白血病细胞中小分子量染色体缺失片段；然后用T4DNA聚合酶和Klenow片 段将DNA片段末断进行平端化处理，并克隆到相应的载体上：然后用全自动DNA测序仪将所 有克隆到的片段进行潮序分析；最后应用相应计算机软件分析和鉴定获得的克隆片段，并应用电 子克隆方法绘制染色体缺失片段谱，用FISH技术进一步验证。一共分析了26例不同类型白血 4倒CML，2例ALL病人的自血病细胞中分离到缺失的染色体片段。避一步分析结果