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光谱法研究阿霉素与DNA的相互作用 李文友1 许金钩z (1南开大学化学系天津300071 2厦门大学化学系厦门361005) 关键词阿霉素DNA相互作用 研究有机小分子与DNA相互作用方式有助于从分子水平上了解抗癌药物的作用机理，阐明 化学有毒物的致突、致畸、致癌的分子生物学机理，了解蛋白质与DNA的相互作用，阐明DNA 的结构和功能，为设计临床上更为有效的抗癌药物提供理论指导，并对更深刻阐明小分子化台物 与DNA的结合规律和机理也有重要意义。 在DNA的存在下，阿霉素(ADM)溶液产生明显的减色效应，同时最大吸收峰发生红移， 并且有一等吸收点出现。另外，DNA的存在使ADM的荧光产生猝灭。本文应用吸收光谱和荧 光光谱等方法研究了ADM和DNA的相互作用。实验结果表明．ADM是以嵌入方式和DNA发 生作用的。 1实验部分 仪器：Hitachi 650—10S荧光分光光度计。Shhadml UV-240紫外可见分光光度计。 明治医药有限公司。 2结果与讨论 2．1吸牧光谱 实验表明，在DNA存在下．ADM的最大吸收产生了明显的减色效应，同时光谱发生红移， 并且在544 nm处有一等吸收点出现。减色效应是由于嵌入到DNA碱基对中的发色团与DNA碱 基时的相互作用引起的。由于DNA碱基对与嵌A其间的ADM分子间发生A·电子堆积，使ADM 的n·空轨道E也有～定的电子填充，从而使ADM跃迁的几率减小，吸光度降低。上述光谱变化 表明ADM可能嵌入到DNA碱基对中。 2．2荧光偏振 实验表明，在DNA存在下，ADM分子的荧光偏振有较大的升高。这可解释为当ADM嵌 入DNA双螺旋结构中后，ADM分子的转动受阻．因而荧光偏振增大。 2．3荧光猝灭 实验结果表明，在没有DNA存在下，ADM fl勺荧光受砌的猝灭程度很大。但在DNA存在 下，Ⅺ对ADM的荧光猝灭程度明显减小。这一现象可解释为ADM分子嵌入到DNA双螺旋结 构中后受到有效的保护从而使Ⅺ对ADM的荧光猝灭程度降低。 2．4溴亿乙挺和船对1)N／t的竞争实验 DNA对ADM的荧光产生猝灭作用，而对溴化乙锭的荧光产生增强作用。实验结果表明， ADM的加入使溴化乙锭．DNA体系的荧光呈下降趋势，说明ADM的加入使溴化乙锭和DNA的 结合反应向左移动。而溴化乙锭是以嵌人方式与DNA结台的。因此，这一实验结果也支持ADM 以嵌入方式与DNA结合的结论。 37l 分析化学的成就与挑战 2．5DNA热变性实验 DNA经热变性后，双螺旋结构即发生破坏。氢键断裂。两条链彼此分离，形成无规则团。 实验结果表明，热变性后的DNA对ADM的荧光猝灭程度明显减弱(表1)。这一实验结果进一 步说明ADM分子是以嵌入方式和DNA发生作用的。 至!翌苎竺!!兰竺竺!翌竺!茎兰堡塞墅堕塑翌生 ctDNA浓度 ctDNA种类 F +ADM_酿度为1．7×l俨m0儿。 2．6DN^对ADM荧光粹灭方式 实验结果表明．在atDNA存在下，ADM的吸收光谱发生红移。温度升高后，DNA对ADM 的荧光猝灭程度减小，说明DNA对ADM的荧光猝灭属于静态猝灭。 011the between andDNA studiesinteraction Spectral adriamycin L／Wenyou‘XuJingou2 (1 ofChemisⅡy,Nankai 300071) Department Unive