2014年高考生物一轮复习1-1第1讲《微生物的培养与应用》PPT课件.ppt

2．(2012·北京海淀期中)下列关于微生物培养的叙述，不正确的是 (　　) A．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵 B．高温灭菌的目的是杀死微生物的细胞、孢子、芽孢 C．划线分离可在培养基上获得均匀分布的单菌落 D．稀释涂布平板法易获得单菌落和计数活菌数目 【解析】　获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵；高温灭菌的目的是杀死微生物的细胞、孢子、芽孢；稀释涂布平板法易获得单菌落和计数活菌数目；划线分离可在培养基上获得单菌落但不是均匀分布的。 【答案】　C 3．(2012·浙江自选)幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下： 配制培养基―→灭菌、倒平板―→X―→培养―→观察 请回答： (1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有①________，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现②________色环带。 (2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是③________灭菌。 A．高压蒸汽　　　　　　　 B．紫外灯照射 C．70%酒精浸泡 D．过滤 (3)步骤X表示④________。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液⑤________到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得⑥________菌落。 (4)在培养时，需将培养皿倒置并放在⑦________中。若不倒置培养，将导致⑧________。 (5)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的⑨________分解为NH3和14CO2。 【解析】　此题考查微生物的分离与培养知识。(1)幽门螺杆菌(Hp)含有脲酶，能以尿素为氮源，在加入尿素和酚红指示剂的培养基中培养Hp，由于尿素经脲酶的降解可产生碱性的NH3，NH3能使培养基中的酚红由红黄色变成红色，故菌落周围会出现红色环带。(2)由于尿素加热会分解，对尿素溶液进行灭菌最好用G6玻璃砂漏斗过滤。(3)微生物的分离和培养步骤是：配制培养基→灭菌、倒平板→接种→培养。为获得单菌落，接种操作前应先将菌液稀释，然后将菌液涂布到培养基平面上即可。 (4)微生物培养时需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中，若不倒置培养，则无法形成单菌落。(5)幽门螺杆菌能将14C标记的尿素分解为NH3和14CO2，故临床上常用14C呼气试验检测人体内幽门螺杆菌的存在。 【答案】　(1)脲酶　红　(2)D　(3)接种　涂布　单 (4)恒温培养箱　无法形成单菌落　(5)尿素 1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 实验原理 (1)筛选菌株：提供有利于目的菌株生长的条件(如营养、温度、pH等)，同时抑制其他微生物的生长，常用选择培养基筛选。 (2)统计菌落数目 ①方法：稀释涂布平板法——统计活菌数(显微镜直接计数法不能排除死菌)。 (3)设置对照：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。 实验流程 土壤取样：从距地表约3～8 cm的土壤层取样 2. 分解纤维素的微生物的分离 实验原理 　　　　　　　纤维素酶(复合酶) 即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 实验流程 土壤取样：富含纤维素的环境 Ⅱ.下面是探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数的实验，完成下列问题： (1)实验原理：农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较多。将用表层土制成的稀泥浆，接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下，只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法，可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来。 材料用具：农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基，盛9 mL无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90 mL无菌水的锥形瓶、恒温箱。 (2)方法步骤： ①倒平板：分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板，操作过程应在火焰旁。 ②制备土壤稀释液：取土样10 g加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液1mL，转至9 mL的无菌水的大试管中，依次稀释到107稀释度。 ③涂布：按照由107～103稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行平板涂布，每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布________个平板，牛肉膏蛋白胨培养基涂布1个平板。 ④培养：放入恒温箱内，在28～30℃下培养3～4天。 ⑤细菌的计数：当菌落数目稳定时，选取菌落数在________的平板进行计数。如果测试的平均值为50，则每克样品中的菌落数是________。(稀释度是105) (3)预测结果：相同稀释度下，牛肉膏蛋白胨培养基平板上的菌落数应多于无氮培养基上的数目。请说明原因。 【解析】　Ⅰ.从土壤中分离以尿素为氮源的细菌时，将土壤用无菌水稀释，制备土壤稀释液，将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上，用加入