2014年高考生物一轮复习1-3第3讲《DNA和蛋白质技术》PPT课件.ppt

4.其他注意事项 (1)甲基绿可将DNA染成绿色且不需水浴加热，二苯胺鉴定DNA属于颜色反应，需要沸水浴加热5 min，可使DNA呈蓝色。 (2)二苯胺试剂要现配现用，否则二苯胺会变成浅蓝色，影响鉴定效果。 (3)DNA进一步提纯(第四次过滤的滤液)时要选用预冷的95%的酒精，作用如下： ①抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解； ②降低分子运动，易于形成沉淀析出； ③低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂。 1．(2012·蚌埠期末)在蛋白质的提取和分离中，关于对样品处理过程中的分析正确的是 (　　) A．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐 B．洗涤时离心速度过低，时间过短，白细胞等会沉淀，达不到分离的效果 C．洗涤过程选用0.1%的生理盐水 D．透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质 【解析】　透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质和更换样品的缓冲液。 【答案】　D 2．(2012·南京质检)下列有关蛋白质提取和分离的说法，错误的是 (　　) A．透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性 B．采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来 C．离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离 D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动 【解析】　带电离子或分子在电场中向着与其所带电荷相反的电极移动。 【答案】　D 3．某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下： 材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10 g。剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于－20℃条件下保存24 h。 DNA粗提取： 第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15 mL研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。 第二步：先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液，再加入20 mL体积分数为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。 第三步：取6支试管，分别加入等量的2 moL/L NaCl溶液溶解上述絮状物。 DNA检测：在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂。混合均匀后，置于沸水中加热5 min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表。 (注：“＋”越多表示蓝色越深) 材料保存温度 花菜 辣椒 蒜黄 20℃ ＋＋ ＋ ＋＋＋ －20℃ ＋＋＋ ＋＋ ＋＋＋＋ 分析上述实验过程，回答下列问题： (1)该探究性实验课题的名称是____________________。 (2)第二步中“缓缓地”搅拌，这是为了减少________。 (3)根据实验结果，得出结论并分析。 ①结论1：与20℃相比，相同实验材料在－20℃条件下保存，DNA的提取量较多。 结论2：______________________________________。 ②针对结论1，请提出合理的解释：________________。 (4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是：_________________________________________。然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。 【解析】　本题考查DNA的粗提取和鉴定的相关知识，分析题意可知自变量是材料不同和材料保存温度不同，因变量是DNA提取量不同。实验目的则是探究不同保存温度和不同材料对DNA提取量的影响。 【答案】　(1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响　(2)DNA断裂　(3)①等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄中提取的DNA量最多　②低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速率慢　(4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间，吸取上清液 1.PCR的反应过程 (1)变性：当温度上升到90℃以上时，双链DNA解旋为单链，如下图： (2)复性：温度下降到50℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，如下图： (3)延伸：温度上升到72℃左右，溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，如下图： 2．PCR扩增技术和DNA复制的比较 DNA复制 PCR扩增技术 场所 主要在细胞核内 生物体外 原理 碱基互补配对 碱基互补配对 酶 DNA聚合酶、解旋酶 耐热的DNA聚合酶(Taq酶) 条件 模板、ATP、引物链 (RNA)、常温 模板、ATP、引物链(DNA及RNA片段)、温度变化 (90～95℃→55～60℃→70～75℃) 原料 四种脱氧核苷酸 四种脱氧核苷酸 特点 形成的是整个DNA分子，一个细胞周期只复制一次