应用现代生物技术深入研究麝香保心丸作用机理.pdfVIP

应用现代生物技术深入研究肠香保心丸的作用机理 应用现代生物技术深入研究璐香保心丸的作用机理 戴瑞鸿 罗心平 施海明 范维玻 复旦大学华山医院心内科 (上海200040) 西医冠心病的诊疗技术集中体现了现代医学发展的最高成就;各种新思路、新技术、新材料的应 用，使该领域处在现代医学的领先水平。冠心病治疗中中西医结合的切人点在于把握、寻求现代医学 尚不能解决、或治疗效果不佳的问题，发展有效的中药治疗;把握中医在整体辨证施治、中药毒副反 应少等优势，充分发挥中医治疗多作用靶点的特点、获得一种治疗在不同病理阶段中发挥作用的整体 疗效;或用现代冠心病的病理生理知识、现代生物研究技术指导中医治疗方法的研究，从不同的角度 探讨新的中药治疗方法，优化中药配伍、寻求有效中药的作用机理。作者在中成药庸香保心丸 (HMP) 作用机理的探讨中采用了后一种方法。 1.分子生物学等技术研究康香保心丸对血管壁的作用机理 现代生物技术在中成药研究中典型的实例是HMP对血管壁作用的基础研究。RMP早期的药理实验 由复旦大学医学院药理系完成。基础的研究证明:苏合香脂、冰片有减慢心率、解除冠脉痉挛的作用; 磨香提取物有扩张血管、强心作用的功效:人参皂贰有抗氧化、正性肌力、降低血脂的作用;蟾酥则 有强心的效果。在临床已经证明HMI〕明显疗效的基础上，采用现代生物研究技术、开始了HMI)对血 管壁作用机理的探讨。为了解HMP的作用部位，张氏采用多道生理记录仪、血管张力测定技术，用离 体鼠动脉环进行研究。将大鼠动脉环一组剥离内皮细胞、一组保留内皮细胞，然后将浸人克氏液中、 先加人去甲肾上腺素诱发收缩，然后加人不同浓度的HMP水浸液，观察舒张反应，并且与乙酞胆碱进 行比较，结果显示:RMP对保留内皮组和剥离内皮细胞组动脉环均有舒张作用，其效应呈剂量依赖 性，保留内皮组的舒张作用明显高于剥离内皮细胞组。提示HMP的扩张血管机制主要是内皮依赖性血 管舒张作用，通过一氧化氮途径完成;同时它也可直接舒张血管平滑肌 为进一步了解HMP对在体血管内皮细胞形态及功能的作用、以及对动脉壁内一氧化氮系统的影 响，作者应用现代显微技术、采用实验性高脂血症兔模型进行了研究 (已证明高脂血症可损害动脉壁 的内皮细胞)。应用光镜、电镜观察兔动脉壁的内皮细胞形态、内膜/中膜比值等形态学变化。光镜研 究表明:RMP有抗实验性动脉粥样硬化的趋势，明显降低内膜/中膜比值。电镜镜检提示:高脂血症 可从形态上造成动脉内皮细胞的损害和脱落;而RMP可减轻血管壁超微结构的损害、保护内皮细胞。 为准确地反映在体血管功能的改变，采用敏感的血管内超声技术评价在体血管舒缩功能，分别测量第 十胸椎水平主动脉基础状态、注射乙酸胆碱及硝酸甘油后血管的腔径和截面积。结果提示:高脂血症 可损害内皮依赖性血管舒张功能;与高胆固醇组比较，HMP使用2周后内皮依赖性血管舒张功能异常 的程度明显减轻，HMP明显改善了内皮依赖性血管舒张功能。 内皮依赖性血管舒张功能异常与一氧化氮的代谢异常密切相关。为深人研究HMP对内皮一氧化氮 系统的影响，在高脂血症兔的动脉标本中，分别采用分子生物学技术、半定量RT一PCR测量动脉壁内 84 中国中西医结合学会成立20周年纪念大会论文集 皮型一氧化氮合酶 (eNOS)-,.RNA的表达水平，用比色法测定动脉壁的酶活力及血清一氧化氮代谢 产物的浓度;围绕一氧化氮的代谢过程，从一氧化氮合酶的基因表达、酶活力测定、到一氧化氮代谢 产物测定等环节系统探讨了HMP对血管内皮一氧化氮代谢的影响。同时用放免法测量血清SOD和血浆 内皮素的水平。结果提示:高脂饮食造成了动脉一氧化氮代谢的紊乱、抑制了eNOS一mRNA基因的表 达 、降低了一氧化氮合酶的活力、减少了动脉壁一氧化氮的水平。加用HMP可部分逆转这种损害、增 强动脉壁eNOS-mRNA的表达，提高了动脉壁一氧化氮合酶的活力，增加了动脉组织一氧化氮代谢产 物的浓度;提示HMP可通过减轻高脂血症对一氧化氮系统的损害、从而改善内皮依赖性舒张功能 这些生物新技术的应用，极大地加深了人们对HMP扩张血管机理的认识，促进了冠心病中西医结 合工作的发展。研究结果提示:HMP通过扩张血管、改善内皮功能等途径而发挥作用。其扩张血管的 机理有直接舒张血管平滑肌及内皮依赖性血管舒张两条途径、主要的作用是内皮依赖性血管舒张;改 善血管内皮依赖性舒张功能的机理是通过升高SOD的水平、降低氧自由基的产生