纤维环组织和细胞的区域差异性研究.pdfVIP

煞!i鲨型燮兰鐾拦些堂墨：銎盆￡墨星曼鐾 肌腱样细胞接种于PLGA材料上，激光共聚焦和扫描电镜观察显示细胞在材料表面贴 附良好，并能够稳定增殖，形成了肌腱样组织。 结论：pEScs可以分化为Msc，经定向诱导后可分化为肌腱样细胞，用于组织工程肌 腱再造。 【关键词】：孤雌胚胎干细胞：间充质干细胞：肌腱再造；PLGA；诱导分化 纤维环组织及细胞的区域差异性研究 型，刘晨1，过倩萍2，李斌1’2+ l苏炳大学gf}j|蓠第‘医院骨科，江苏省苏炳亩十椁街l号21sQ06 z苏强大学营’科研究所．江苏省苏炳市人民路7髓号2lS∞’ 目的：近年来通过组织工程方式构建仿生纤维环的研究逐渐受到重视。为此，需全面 了解该组织的微观结构、生化组成及力学特性。尽管已知纤维环组织沿径向不同区域 在细胞和基质组成方面差异明显，但仍缺乏详实数据。本研究拟提取兔椎间盘纤维环 外、中、内各区组织及细胞，鉴定它们之间在基质组分、细胞基因表达和力学性能等 方面的差异性，以作为纤维环不同区域表征的参考标准。 方法：将兔椎问盘纤维环组织分离为外、中和内三个区域，经胶原酶消化后获得的细 胞在含20％胎牛血清的培养液中培养。观察纤维环各区域的细胞形态；利用Real-Time PcR检测细胞基因表达；通过WestemBlot免疫印迹和免疫组化考察蛋白含量；通过纳 米压痕和细胞牵引力技术鉴别组织及细胞的力学性能。 结果：细胞形态学结果显示纤维环外区主要分布着类成纤维细胞，呈梭形，内区集中 分布着类软骨细胞，呈鹅卵石形或圆形，中区则具有内外层的混合细胞。Real．Time PCR、Westem I表达高，内区colII和 Blot和免疫组化分析结果均显示，外区Col Aggrecan表达高，中区则介于内外区之间。外、中、内区纤维环组织弹性模量呈递 减趋势。各区细胞的牵引力存在明显差异。 结论：椎间盘纤维环各区域所承担的生物学功能有所不同，其细胞类型、基质组成和 力学特性也具有明显差异。本研究通过定量、半定量或定性的方式系统考察了纤维环 纛 !i筮墓兰兰鐾墼地竺：坠星墨星曼盛一 的区域特异性，可以此作为纤维环不同区域表征的参考标准，将有益于纤维环及椎间 盘组织工程的研究。 【关键词1：纤维环；区域差异性 抗骨硬化素单链抗体基因的构建、表达，产物纯化及活性分析 姚琦-，倪杰，，侯宇-，艾笛t，丁立祥-，张里程：，刘长振3，郁卫东。 l。首都医辩大学嗡霭北京世纪坛医院骨科。北京100凹8：2j中国人民蜒敌军总医院骨科。jE京 目的：构建抗骨硬化素单链抗体表达载体并进行活性分析。 和West-blot检测表达蛋白的反应活性，茜素红染色观察单链抗体对体外培养骨髓间 充质干细胞成骨分化的影响。 结果：测序结果表明vL基因序列全长339碱基对，编码“3个氨基酸，Vl{基因序 列全长330碱基对，编码110个氨基酸，二者均符合小鼠免疫球蛋白可变区的基因特 体特征性的2个半胱氨酸残基；构建的scFv全长687个碱基对，编码229个氨基酸， 体外诱导分化结果显示scFv能够促进矿化结节的形成。 结论成功构建了抗sOST单链抗体表达载体，表达产物具有确定的的免疫结合活性 和有效的体外诱导分化成骨作用，为抗体治疗骨质疏松疾病奠定了实验基础。 f关键词】：单链抗体；骨质疏松：表达；活性