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微唯物学杂忠1999年9月第19卷第3期JOURNAl．OFMIcROBl0LOGYSept．1999V01．19No
-研究简报·
微载体培养Vero细胞精制狂犬病疫苗的研究
鞠长军
(1乏春妊堆实业股份有限公司131J000)
自本世纪70年代狂犬病二倍体疫苗研制成 获之病毒液合并后。以，J{鼠脑内法酒定病毒．毒力
功并批量应用以来，各种细胞疫苗相继研制成功 达到7logLD蜘／rrd以上。
并投人生产和应用，已在许多国家代替了传统的 2．3病毒收获液的灭活
脑组织疫苗。我们对Veto细胞微载体培养的狂 狂犬病毒收获液加入终浓度1／4000的B一
犬病疫苗作了初步研究。为大规模生产提供依据。 丙内酯，4℃，24h灭活。
2．4 ZnAC盐析提取狂犬病毒抗原
1材料与试剂 对3批狂犬病毒收获液进行抗原提取，ZnAC
浓度为0．05nml／Ls[)ROL等人研究发现ZnAC
1．1 Veto细胞
沉淀狂犬病毒有25％的血清蛋白与狂犬病毒共
由中国药品生物制品拴定所提供Vero细胞
沉淀。纯度仅提高4倍【4J，ZnAC沉淀粗提液进行
125代种子细胞。
G一25桂层析是十分必要的，不仅除去
1．2病毒株 Sephadex
高浓度饱台Ⅱ丌A盐类，同时除去了低分子量的
狂犬病毒Vero细胞适应株ClNC∞由梧定
血清蛋白等不纯物质。
所提供，毒力为7．1logLIM／ml。我们对病毒栋
2．5分子筛层析
进行了适应性传代，毒力达爿8．24
logLEM／ml。
经Tris—EDTA溶解的狂犬病毒收获液经柱
高子国内发表材料4aG．Fluay．Lep株【1·2】的擒
层析除盐后，经SephamseFF4B的分子筛层析过
度。
滤．用紫外监测可见2个洗脱峰。第一峰分步收
1．3生物反应嚣
集合并后，检测结果见表1。
Dl∞NewBrunSwick．∞ientificUSAo
Q心gen
．表1 狂犬病毒收获液层析后捡定姑果
2方法与结果 批发上样t第．峰蛋白震抗原t残余 小牛效力
收集t含量DNA血清
!型 !型』缱：型：!!旦壁』堡：型：!』埋：型：!』型
2．1 Veto细胞在触体上的悬浮培养
60 0．901 240 一
Vem9601 150 180 2—3
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