铁蛋白电子显微镜研究.pdfVIP

Microsc．Soc 电子显微学报J．Chin．Electr 17(4)：321～3221998年 32l ≥铁蛋白的电子显微镜研究+ 刘 维1董汉民1周筠梅2李林1 (1．中国科学院物理研究所和中国科学院凝聚态物理中心，北京】00080) (2．中国科学院生物物理研究所，北京100101) 铁蛋白是一种常见的水溶性蛋白。分子量为45万道尔顿。X射线衍射分析的结果…表明，它 储存4500个铁原子。即使不用染色，也能很容易地在电子显微镜中观察到。铁蛋白的提纯很容 水银表面上成功地生长出铁蛋白的二维晶体，并得到了沿三次轴方向的投影结构，与x射线衍 射分析给出的结果是一致的。本文报导了铁蛋白在沉淀剂的作用下得到了薄晶和二维晶体，并进 行了电子显微镜研究。得到了投影结构与X射线衍射分析的结果做了对比。 实验方法和结果 用市售的铁蛋白分离提纯后，加入少量的硫酸铵，常温下放置一周。在溶液中产生沉淀物后， 取出一滴带有沉淀物的溶液，滴在经过亲水处理的碳膜上，用1％的醋酸铀染色。制好的电镜样 品用JEM一200 CX型高分辨电镜在200kV下进行观察，所用的电子光学放大倍数为3．5万倍。 图1是铁蛋白薄晶的电子显微像。薄晶是边长为2×3p-m大小的薄片，有些比较完整，呈斜 长方形，夹角为74。和106。。有些不太完整，中间呈断裂状，但边长及夹角都是一致的。图2是薄 晶的晶格像。在电子显微镜放大倍数为3．5万倍时，即能拍摄到薄晶体的二维晶格点阵像，从像 由单个铁蛋白分子周期排列构成的。由于薄晶只具有2次对称，所以可以认为单个铁蛋白分子沿 二次轴方向周期排列后构成了薄晶。通过对薄晶高分辨像的付氏变换和过滤噪音处理后，得到铁 蛋白分子沿二次轴的投影结构。此外，还对用此方法生长的铁蛋白二维晶体进行了研究。 结论 用电子显微镜研究水溶性蛋白时，用沉淀剂来使水溶性蛋白形成薄晶和二维晶体是一种简 单可行的方法。它能给出水溶性蛋白沿某一方向的投影结构，有助于进～步研究蛋白质的三维结 构。 参考文献 S DKand P [13BanyardH，StammersHarrisonM．Nature，1978．271：282． H，MatsumotoM，EndoSand [2]Yoshimura Nagayama K．UltramicYOSCopy，1990，32：265． *国家自然科学基金资助项目 电子显微学报j．Chin．Electr．Microse，So。· 322 坚：!!竺竺! 一．—— ——_——，●，——_——_——_●h——_——————●——^●——————————_——————_——一一 图l铁蛋白薄晶的电子显微像 图2铁蛋白薄晶的二维品格像