Cu(ll)离子对多巴色素作用紫外-可见光谱研究.pdfVIP

口1-02 Cu(II)离子对多巴色素作用的紫外一可见光谱研究 狄俊伟·，屠一锋 黑色素广泛存在于人类、动物和植物中，具有多种生理功能“-“。黑色素是由酪氨酸或多巴在酶 或过渡金属离子催化下经一系列氧化过程而生成，多巴色素是其中较稳定的一种中间体。虽然酪氨酸或 左旋多巴氧化生成多巴色素的机理已相当明白，但多巴色素进一步形成黑色素的形成机理、组成和结构 尚不完全清楚：a。除了直接影响黑色素形成的酪氨酸氧化酶、多巴色素互变酶和DHICA氧化酶外，过氧 化氢氧化酶、黄嘌岭氧化酶和脂肪氧化酶等多种酶和过渡金属离子“3如铁、铜、钴、镍、锌等金属离子 也起重要的作用，并影响黑色素的结构。其中尤其是cu(n)，不仅存在于酪氨酸氧化酶中，而且可在 神经黑色素中富集，造成“氧化”压力，因此形起了极大的关注。 Organics产品，储备液用去氧的二次蒸馏水配制，在低于20℃ 左旋多巴(99％)为瑞士Acros 的室温下可存放约一周。其他所需试剂均为分析纯。PH6．5缓冲液由KH2POa和KOH配制。 紫外一可见光谱用7530G分光光度计(惠普上海分析仪器有限公司)测定-比色池厚度为1cm。 多巴色素的制备：取一定量的左旋多巴溶液．加适量去离子水及Mn02固体，振荡约10—20分钟， 采用倾析法得到多巴色素溶液。多巴色素不稳定。只能存在于水溶液中。僵多巴色素具有一定的稳定性， 在22℃时至少可稳定卜2小时，最后在6一12小时变成黑色。 图1 紫外一可见光谱圈。a—j，每隔2．5分钟记录一次；k，加H202∞分钟后记录a sol一1 L cm。)和305 多巴色素紫外一可见光谱的特征吸收峰为475nm(￡=3600 nm。实验取多巴 0．Olmol／L m1缓冲溶液，混合后通氮气除氧，然后加入20“1 cu(II)溶液，每 色素溶液4ml，加入1 13111特征吸收峰逐渐减小，同时可形成 隔2一．分钟记录一次紫外一可见光谱图(图1)。多巴色素的475 nm的全程吸收性质，因此生 黑色素，但黑色素的生成速度在反应前期相对较慢。黑色素具有300—800 161 物体利用它抵御紫外光的损伤。A4。可减少至原多巴色素峰高的约…半．然后基本保持不变。在此体系 中，再加入0．25mi 0．1％的H202．20分钟后记录其紫外一可见光谱图为图1曲线k．由图可见山％和A650 同时增加。 nm)．又可脱氢形成5，6一_羟基吲哚一2一 多巴色素重排时既可脱羧形成5，6-二羟基吲哚(DHI，297 羧酸(DHICAE“，约310nm)，在过渡金属离子作用下，如cu(II)的催化下，可增加DHICA，DH]的比例。一。 nm，说明 从图1可看出，多巴色素的306nm峰在重排反应过程中向长波长方向移动，最后停在约313 由于DHICA的反应活性较DHI要差很多，反应速 有大量的DHICA生成。当体系中加入氧化剂H202后， 度度较慢，因此在紫外可见光谱图中还可见到反应剩余的少量DHICA的313nlll吸收峰。 从上述实验结果我们推测cu(II)不仅可催化多巴色素重排形成无色的DHICA和DH]，而且可催化 多巴色素氧化反应活性强的DHI生成吲哚一5，6-醌(IQ)，IQ一经形成，立刻聚合形成黑色素或与吲哚一5，6一 醌一2羧酸(IQCA)共聚形成黑色素。