1，2，4-三羟基蒽醌-铝体系核酸荧光探针地研究、反应.pdfVIP

第27卷增刊 福州大学学报(自然科学版) V01．27 12塑生2旦 !竺!!!!堕里坚!!!旦型!!型!!型!!!垡!!!!!!12蔓塑：!!塑 1，2，4一三羟基蒽醌一铝体系核酸荧光探针的研究、应用 f 蔺存国1，张桂玲2，董飒英1，杨景和3 (1．中国船舶工业总公司第725研究所青岛分部，山东青岛266071；2．青岛海洋大学化学化工学 院。山东青岛266003；3．山东大学化学院，山东济南250100) 摘要：介绍丁一种新的核酸荧光探针，它与DNA作用产生了一种新的荧光现象，本文对产生该 现象的机理进行了深入的探讨，并将其应用到了对核酸的分析测定中． 关键词：核酸：1,2．4．三羟基蒽醌；铝；荧光探针 中图分类号：0657，32；Q523 文献标识码：A 核酸作为生物体生命遗传的物质基础，在生命过程中具有十分重要的功能和作用，对于 它们的研究已经成为生命科学的重要内容．因为荧光技术具有灵敏度高，信息量太等特点． 故荧光光度法在核酸研究中具有独特的优势．但由于核酸自身的荧光非常弱，使得人们无法 直接利用其发射荧光的特点来对其进行研究。所以荧光探针法便成为研究核酸的重要工具． 常用的核酸荧光探针主要有有机染料、金属配合物、金属离子和光化学等类型． f 本文在实验中发现，铝在酸性条件下，与1，2，4一三羟基蒽醌(THAQ)结合后能够产生较 强的荧光．随着DNA的加入，THAQ-A)产生的荧光先是降低。然后又增强至一最太值， 这在关于DNA的研究中是未报道过的．本文认为该现象是静电作用和微环境非极性作用相 互竞争的结果．将该现象中的荧光猝灭性质应用到对核酸的检测中，得到令人满意的结果． 1结果与讨论 1．1荧光光谱 生，最大激发和发射峰分别在465、495和550、575 系中，荧光强度有明显变化，最大激发和发射峰的波长没有移动．在本文中，选择 k=49513m，i。=550llm处的发射峰来作迸一步研究． ’ 1．2核酸的加入对THAQ—Al体系荧光强度的影响 ， 有猝灭作用，随着浓度的增太，荧光强度逐渐降低；而当Ro．53时。随着DNA的继续加 入，其对THAQ-AI的荧光又起增强作用，荧光强度逐渐升高直至最大，出现一近似平台． RNA的加入对TnAQ—A1的荧光只有猝灭作用，但在加入到一定程度时猝灭速率有所降 低．在一定范围内，DNA和RNA的加入量与荧光猝灭程度之间呈线性关系．本文中利用 核酸对THAQ—A1荧光的这种猝贝性质来分别对DNA和RNA进行定量测定． 收稿日期：1999-05—06 作者简介：蔺存国(1973-)，男，硕士 ·85· 增刊茼存国等：1,2，4羟基蒽醒一铝体系核酸荧光探针的研究、应用 1．3影响体系荧光强度的因素 时，DNA能够使THAQ-A1体系的荧光猝灭程度达到最大，RNA与其相似． 晶／，能够达到最大．因此该体系中二者的最佳摩尔比为1：1．RNA与其类似． rain． 3)稳定性实验在最佳条件下，R／F在10min内达到最大，并且能够稳定40 环境则起相反作用． 增强作用。这说明这种荧光增强作用明显地与DNA的双螺旋结构环境有关系． 2机理讨论 DNA加入时。剩余的正电荷会与其上的磷酸根发生静电作用，该作用将会导致Ar+与 和热解离后韵DNA都存在着磷酸根，因此