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0139、01群霍乱弧菌分子遗传特征研究
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解放军第三。二腰院(100099) 丰伯安 季永别 姜天佳 李元治
解放军医学高等专科学桎 撩挂永 量：枣医’}蚪学院二肝 王全主
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(PCR)、DNA序列分斫阳髓饥扩增多态性DNA对旧}?j外()139群御OI群霍乱弧菌分子遗传特
征及其辛H互关系进行探讨．以胡为浚病预防提供参每。
材料和方法
1菌株：见耐麦。
附表 菌蛙每漂奠序号
苗号 蕾辟 ￡日号 生_l!I型 血谭型 来豫
1 0139群 1e9{年舟离自我国北疗某地
2 Ol39群 同上
3 0139群 M04
5(印度 中国琢防医学辩学院赢行病学研竞所
{ Ol群 ElTot 小川 1994年丹离冉我国北方某地
5 01群 8600610 古冀 小川 军摹匪学垂}学院赣生喾，所
6 OI群 860071 古典 稻叶 同上
7 01群 J73—1054{ ElTor 小，If 同上
8 01群 650374 ElTor 小』Il 同上
9 大肠埃希菹 解垃军302医院髓生物室提供 ：
一一
5LTAGAGCTTG—
2．PCR扩增：PCR引物按ctxA2-B亚单位基因设计，上游引物P1
1
GAGGGAAGAGCCGT(1082104)，下游引物P25
(1647，1
625)，DNA提取方法，PCR扩增仪及条件同文献。各种试剂购于北京天象人生物公司．
PCR—PureKit纯化，
3．DNA序列分析：PCR扩增DNA片段用美国Clontech公司Advantage
用美国PE公司GeneticAnalyzer进行DNA序列分析．
GGGGTGAc—
A2。B基因的下游引物P2和随机引物P3
4．RAPD：分别罘用PCR扩增的ctx
20秒．36℃，60秒·40个循环
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