菜豆抗草甘膦基因遗传和转移的研究.pdfVIP

菜豆抗草甘膦基因遗传及转移的研究+ 陶波秦智伟 (东北农业大学农学院哈尔滨150∞0) 摘要本文通过抗性选育和DNA导^技术．研究了莱豆抗草甘麟基因的遗传特性和转抗性DNA植株的抗性稳定性。结 果表明不同菜豆品系对草甘膦抗性具有明显差异，抗性品系％一05的不同世代抗性有明显分离，但经过几代抗性选育． 已选出抗性稳定的一05—3—5等品系，而且草甘麟的不同剂量对此品系抗性影响比上代弱。转抗性DNA植株能获得抗性 表达．并且抗性稳定性较快。 美■词草甘膦。DNA导人技术，抗性基因 抗除草剂作物筛选和利用是开发选择性除草剂的新途径，它不但有助于抗除草剂遗传的 研究。而且通过抗性基因的利用和转移为抗性育种提供新手段，丰富了抗性育种材料。草甘 膦是一种灭生性除草剂，具有很高活性…。许多学者试图利用草甘膦除草活性在作物上应 用，如DyerW．E．等(1998)利用组织培养方法筛选出对草甘膦耐性较强烟草变异体【4』， Staller D．M．等(1985)对细胞中Epsp合酶编码基因和抗草甘膦药性关系进行研究，并对细 菌Salmonella typhimuriumEpsp合酶基因atoA克隆呤J。美国孟山都公司的研究人员把al以 基因转移到大豆、烟草等作物中，其抗性在作物植株上得到表达№n…。但在作物中发现高抗 草甘膦基因，特别是在菜豆中发现抗草甘膦基因，并对其遗传性进行研究，到目前为止还没 见报道。本文利用已筛选出的抗草甘膦菜豆品系，对菜豆抗草甘膦基因进行遗传稳定性研 究，并对抗性基因转移的可能性进行探索，以便为抗除草剂育种及扩大草甘膦应用范围提供 理论依据。 1材料和方法 1．1试验材料菜豆品种：30个品系 除草剂：41％草甘膦水剂(美国盂山都公司提供) 1．2抗性鉴定方法在菜豆出苗后15天，用草甘膦每公顷1千克(有效量)作茎叶处理 -致谢在课题的研究及论文的撰写过程中武慵样教授、苏少泉教授给予了大力的协助。特此表示感谢 344 在出苗后30天，再用同样剂量草甘膦处理，并观察菜豆生长发育及结实率。同时对抗性品 系的不同世代，进行抗性程度鉴定，草甘膦剂量为每公顷1千克、1．5千克、2千克茎叶处 理，处理时问与抗性鉴定相同。 1．3抗性品系的世代选育利用筛选的抗性杂种品系，对其不同世代进行抗性鉴定，研究 其抗性基因特性。 苗的DNA，并采用花粉管直接导人技术-3J，将DNA导人到敏感型菜豆品系89一13植株中。 并以花粉杂交为对照，对其后代进行抗性鉴定。 2结果与分析 2．1菜豆不同品系对草甘膦抗性反应菜豆不同品系对草甘膦的抗性反应明显不同(表 1)，89—05品系对草甘膦表现出明显的抗性，存活率为77％，经过草甘膦第二次处理。其 处理它们的存活率为20％一51．4％；第二次处理存活率为5．7％～10％，但莱豆生长受一定 抑制。其他品系在草甘膦处理后受害严重，大部分品系接近死亡，草甘膦第二次处理后全部 死亡。这说明菜豆品系中存在高抗草甘膦基因。 表1菜豆不同品系对草甘群抗性反应(剂量为1千克／公顷) 345 2．2抗性菜豆品系的遗传稳定性89—05品系后代对革甘膦抗性产生分离(圈1)，所有后 存活率分别为10％、8．5％和42．9％。其后代都表现明显抗性，但有一定差异。89—05—2 和89—05—1品系抗性明显低于母本，而89—05—3对草甘膦抗性明显高于母本89—05。说 明89一05抗性遗传稳定性较差，抗性基因并不完全纯合。 图189一05品系的后代对草甘辟抗性反应(剂量lkgai．加) 通过对三个品系后代进一步选育发现，三个品系的后代对草甘膦抗性反应也有较大的差 于50％，说明分离现象非常明显，而89一05—3的8株后代中，有6个株系存活率高于 50％，其中89—3—5和89—05—3—7两株系存活率为100％，植株生长发育不受任何影响， 说明89—05—3分离较轻，其中两株系已接近纯合，其抗性呈数量遗传性状，可能受多基因 控制。经一定抗性选育后，菜豆抗性基本稳定。 表2 89—05一(1，2，3)品系的后代对草甘脯抗性反应 2．3不同剂量的草甘膦对菜豆抗性各世代的影响抗性菜豆的不同世代对不同剂量草甘膦 处理有一定差异(图2)