胶束电动毛细管色谱分离测定烟草中亚硝胺.pdfVIP

全国生物医药色谱学术交流会(2008)论文集 E33胶束电动毛细管色谱分离测定烟草中的亚硝胺 - 李琛琛杨悠悠文大为 潘胤瑾张建勋 刘虎威书 北京大学化学与分子工程学院，100871，hwliu@pku．edu．ca 1．前言 自20世纪70年代以来，人们对烟草和卷烟烟气中的亚硝胺进行了广泛的研究。卷烟烟 气中已发现的弧硝胺达35种之多，其中烟草特有亚硝胺(TSNAs)最受关注。目前已经鉴定出8 种TSNAs，也有相当数量的文献对它们的毒理作用进行了研究【I七J。为了减少吸烟对健康的危 害，人们对降低烟草和卷烟烟气中TSNAs的含量进行了大肇研究：在进行这些研究时，必须 分析大量烟草样品。因此，TSNAs的检测方法对于减少卷烟危害研究具有十分重要的意义。 这六种TSNA。通过一系列的优化过程，确定了磷酸盐缓冲液分别在酸性和中性条件下，实现 了六种TSNAs的基线分离。 2．仪器与实验条件 Alto，CA，USA)， 全部电泳实验完成于Agilent3D毛细管屯泳仪(AgilentTechnologies，Palo 仪器使用风冷温控，配备DAD检测器。 lami．d．×48．5 熔融石英毛细管50 ClTI(河北永年锐沣色谱器件公司)。40mmol／L磷酸 mmol／L 盐缓冲溶液，130 kv，温度20oC，UV检测波长为240 SDS，pH=6．5，毛细管电压20 nm，50mbar压力进样5s；80 lnmo儿SDS，10％ACN， mmol／L磷酸盐缓冲溶液(pH=2．5)，75 nm，50 S。 毛细管电压一20kV，温度20oC，UV检测波长为240mbar压力进样5 3．结果和讨论 mmol／L 在实验中我们采用含有50mmol／L磷酸盐和50 2．0—8．0的 SDS胶柬体系，在pH 范围内，考察pH对分离选择性的影响。在酸性条件下，负极进样，随着pH增大，由于EOF 增高，TSNAs保留时间增大，分离度增大同时分析时间增长，当4．0pH6．0时，由于分离时 间太长观察不到出峰。最优化的酸性条件下pH=2．5，这个结果和CZE模式类似。在碱性条 件下则正好相反，随着pH增大，EOF增高，TSNAs分析时间缩短但分离度减小，因此在中 6．5时分离度最佳。 性条件下TSNAs的分离效果比较好，pH SDS是影响MEKC分离的一个重要参数，采用80mmoVL的磷酸盐缓冲溶液，在50—180 mmol／L的范围内，考察SDS对分离效率的影响。结果表明，酸性条件下，负极进样，随着 SDS浓度的增加：离子强度增强，SDS浓度的增大提高了TSNAs和SDS胶束的亲和作用， mmol／L为最优化条 使得目标化合物带电量增大，分离速度／叟快，因此我们选择浓度适中的75 件。中性到碱性条件下则情况所有不同，随着SDS浓度的增大，离子强度增强。EOF下降； 同时，SDS浓度的增大提高了XAN和SDS胶束的亲和作用；然而，SDS浓度的增大使被分 析物所带负电荷与SDS胶束所带负电荷间的电荷排斥作用也随之加大，使得TSNAs在胶束中 的分配减小。以上三种因素决定了TSNAs的保留时问的变化模式。综合考虑分离时问的因素， 我们选择SDS浓度为130mmol／L作为中性条件下最优化条件。 有机添加剂的加入可以显著改善背景缓冲液的疏水性质，抑制被分析化合物在胶束中的 保留。