几种裂变产物混合物内照射诱发淋巴细胞HPRT基因突变、染色体畸变与微核率研究.pdfVIP

’98全国辐射防护学术研讨会论文汇编 1998年11月 几种裂变产物混合物内照射诱发淋巴细胞 HPRT基因突变、染色体畸变和微核率研究 赵经涌 徐永忠 劳勤华 (苏州医学院，215007) 摘要应用多核细胞法研究几种裂变产物混合物内照射诱发大鼠外周血淋巴细胞HPRT基因位点 突变及其剂盘效应关系，并与染色体畸变和微核进行比较．结果表明，淋巴细胞HPRT基因位点突变不 仅随内照射剂量增加而增加，呈现出良好的正相关，而且与染色体畸变率和馓核率亦呈现出较好的相关 性． 关键词裂变产物内照射大鼠HPRT基因位点突变染色体畸变微核剂量效应关系 哺乳动物体细胞次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)基因位于x染色体上。近年来的研 究表明，HPRT基因不仅对电离辐射敏感，而且其突变是不可逆的，可以在体内累积．因此HPRT 基因不仅成为研究电离辐射所致DNA损伤和人体远期效应的较为理想的靶基因，而且有可能成 为辐射生物剂量计o“]。目前用于检测HPRT基因位点突变的方法有放射自显影法、克隆法和多核 细胞法等。其中多核细胞法简便、快速、灵敏且检出率较高[“。 本研究采用多核细胞法探讨放射性核素内照射诱发大鼠外周血淋巴细胞HPRT基因位点突 变，并与传统生物剂量计——染色体畸变和微核进行比较，以期为HPRT基因位点突变能否作为 辐射生物剂攮计，从内照射角度累积一些资料。 1材料和方法 ． 1．1材料 1．1．1裂变产物混合物 本研究所用裂变产物混合物组成及其放射性活度比例分别是：”sr，26．82％I”，Cs，73．15“I “4Ce．“‘Pr，0．002％；抽6Ru_t06Rh，0．02％，％zr一弧Nb，微量。 1．1．2动物 Wistar雄性大鼠，体重146士19 g，由苏卅I医学院实验动物中心提供。 RPMI 1640培养液系美国GIBCO公司产品；小牛血清购于华荚生物工程公司，植物血凝素(PHA) 购于广州医药工业研究所。 1．2方法 (1)大鼠随机分成5组，其中1个对照组，4个实验组，每组8只。对照组尾静脉注射生理盐水 mL／100 (pH3．o)，注射量为0．5 g体重。注射后1 d心脏穿刺取血。实验组尾静脉注射比活度为 3．64×105Bq／mL裂变产物混合物溶液(pH3．o)，注射量同对照组。注射后1、3、6和9d心脏穿刺 ● 取皿。 一l一 一 赵经涌等；几种裂变产物混合物内照射诱发淋巴细胞HPRT基因突变、染色体畸变和微核率研究 000 mL混匀后，1 (2)取抗凝血1．5mL于离心管中，加Hank’s液8 rain，去上清 rpm离心10 1640，10％灭活小牛血清， 液，再重复洗涤一次。将沉积血细咆悬浮于生长