白菜高效遗传转化体系的研究进展.pdfVIP

中国油料作物学报 2013年10月 Chinese ofOil Sciences JournalCrop 白菜高效遗传转化体系研究进展 贾艳丽，吴磊，卢长明+ (中国农业科学院油料作物研究所，农业部油料作物生物学与遗传育种重点实验室，湖北武汉，430062) 摘要：随着白菜全基因组测序的完成，白菜开始成为植物功能基因组研究的模式植物，白菜基因的功能研究需 要有一个高效的白菜遗传转化体系为基础。然而，白菜遗传转化困难，已成为影响白菜基因挖掘和功能研究的一 大障碍。围绕白菜的遗传转化技术，从遗传因素和外界因素两个方面着重介绍了农杆菌介导的白菜遗传转化体系 中不同因素对再生频率和转化效果的影响，为进一步研究高效的白菜遗传转化技术和开展白菜的功能基因研究提 供参考。同时，也对转基因白菜品种培育的研究进展进行了介绍。 关键词：白菜；遗传转化体系；基因型；再生频率 化效率的因素，对于建立高效的白菜遗传转化体系 白菜(Brassicarapa)是重要的蔬菜和油料作 物。随着白菜全基因组测序计划的完成，白菜开始 和推动十字花科植物的功能基因组研究具有重要的 成为十字花科植物功能基因组研究的模式植物…。 意义。 高效的白菜遗传转化技术是研究白菜基因功能和培 1 影响白菜遗传转化的遗传因素 育转基因白菜品种的重要环节。作为十字花科植物 中完成全基因组测序的唯一作物，今后白菜的基因 1．1植物基因型的影响 克隆和比较基因组研究等将越来越多地依赖于高效 外植体具有较高的再生频率是建立植物遗传转 的白菜遗传转化技术。 化体系的首要条件之一。用于植物基因转化的外植 遗传转化技术被广泛用于基因的过表达分析、 体，必须易于再生，有很高的再生频率，并且具有良 启动子功能研究、基因敲除、基因沉默口，31以及靶标 好的稳定性和重复性，以便在大量的多次的转化实 验中都能获得成功。由于植物基因转化操作中的一 模仿(敲除miRNA的功能)H1等。另外，插入突变 体库的建立也要基于高效的遗传转化技术。 些处理，如农杆菌的侵染、抗生素的使用等都会使转 然而，白菜遗传转化困难，大多数品种仍然难以 化外植体比非转化外植体的再生频率有不同程度的 获得转基因后代。这一现状已成为制约白菜基因挖 降低，因此，基因转化受体系统必须具有高频的转化 掘和功能研究以及转基因白菜育种的一大障碍。迄 率及较强的再生能力，只有这样，转化的外植体才能 今为止，白菜的遗传转化主要采用农杆菌介导的转 进一步脱分化和再分化。 化方法。该方法受到组织培养中组织再生能力的限 植物基因型显著影响外植体的再生频率。外植 制，并且受体基因型对转化效果的影响也很大。 体的再生能力主要是由核基因所控制的¨1。通过 近年来，各国科研工作者针对白菜的遗传转化 农杆菌介导的方法，芸薹属植物中的油菜、甘蓝、芜 开展了一系列的探索，并取得一定进展。研究显示， 菁等的遗传转化都已获得了很大成功Mqj，但是白 影响白菜遗传转化效率的因素可以概括为遗传和环 菜离体不定芽再生困难¨0|。近些年，白菜的遗传转 境两大类。总体上，芸薹属物种中，控制植物再生的 化研究显示，白菜的转化频率较低，最低至1％以下 基因主要分布在c基因组(甘蓝类植物)，而且白菜 (表1)。有研究显示，与芽形成相关的基因可能位 的不同基因型在再生频率和转化频率方面也都有很 于c基因组上，这也可能只是具有A基因组的