Killin介导p53信号通路的机理与其在细胞周期不同时期特异性分布的相关性研究.pdfVIP

2015年 3月 四川大学学报(自然科学版) M ar． 2O15 第 52卷 第2期 JournalofSichuanUniversity(NaturalScienceEdition) Vo1．52 No．2 doi：103969／j．issn．0490—6756．2015．02．040 Killin介导P53信号通路的机理与其在细胞周期 不同时期特异性分布的相关性研究 旷 怡 ，梁 朋 。 (1．四川大学生命科学学院，成都 610064 2．生物治疗 国家重点实验室 ，成都 610064) 摘 要 ：本研 究中，通过检测killin在其它P53下游相关基 因缺失的情况下能否激活细胞凋 亡，证 明了p53通过 killin介导的 S期抑制 以及细胞 凋亡与 p21、puma和bax通路没有直接 关系．另外通过将 EGFP-PCNA和 RFP—killin表达质粒共 同转染到 cosE5细胞 中，并观察细 胞处于不同时期时Killin蛋白的分布情况，发现在细胞 S期中Killin与PCNA的核定位呈现 相互排斥的点状分布 ，与先前 BrdU标记结果吻合．这一结果再次印证 了Killin在 S期可能 抑制 DNA复制．同时Killin被观察到在非S期时聚集于核仁 内，从而可能影响核糖体 RNA 的合成．这些发现意味着 killin作为主要 的P53靶基因之一，可能在细胞周期不同检查点进 行调控 ． 关键词 ：p53；DNA复制 ；Killin；核糖体 RNA 中图分类号：Q291 文献标识码 ：A 文章编号 ：0490—6756(2015)o2—0446—05 Mechanism ofkillin inp53mediatedcellcycleregulation and itscellcyclespecificdistribution KUANG Yi ．LIANG Peng ’。 (1．CollegeofLifeSciences，SichuanUniversity，Chengdu610064，China； 2．StateKeyLaboratoryofBiotherapy，Chengdu610064，China) Abstract：Killinfunctionsinp53-mediatedSphasearrestandapoptosisintheabsenceofp21，pumaand baxwerereported．Throughco—transfectionofEGFP—PCNA andRFP—killinplasmidsintocosE5cells，It wasshownthatKillin andPCNA exhibitinmutuallyexclusivepatternin thenucleusduringSphase． ConsistentwithpreviousfindingusingBrdU labeling，theseresultsconfirm thatKillinmayfunctionin S-phasecheckpointcontro1．Surprisingly，wealsoobservethatKillinlocalizesmostlyincellnucleolusin non—Sphasecells，suggestingapotentialroleofKillininnegativeregulationofrRNA biogenesis．Thus， asamajorp53targetgene，killinmaymediatep53functionsinmultiplecellcyclecheckpoints． Keywords：p53；DNA replication；Killin；rRNA 癌基因，是全球癌症发生机理研究领域 内最受关 引 言