益气通络方对缺氧再给氧心肌细胞bcl-2基因表达的影响的血清药理学的研究.pdfVIP

第16卷 长春中医学院学报 Vd】6 ^凹如“如Pei-iodledqf Tr础如拙lChineseEedie；．t’e ChongehtmColle,舻af 7．0000 PH8．0，10rranol／LEDTAPH8．0，10mmol／LNaQ， 表明确，经缺氧24h再给氧4h处理体外培养心肌细 1％SDS．1z耐砒蛋白酶K)重悬，置50℃恒温水浴箱胞，提取DNA电泳显示典型的梯形改变(圈略)。 内消化过夜，至混合渡透亮，然后加平衡酚500ut抽2．2益气通络丹对缺氧—再给氧心肌细胞凋亡比率 提。上下颠倒数次，充分混匀后．6000nⅫ离心5mln。的影响 本实验结果表明．缺氧再给氧能增加心肌细 取上清，加500ta氯仿异戊醇抽提液，上下颠倒数次，胞凋亡比率．益气通络丹低、中、高剂量含药血清均能 降低心肌细胞凋亡比率(P0．01)，(表略)。 充分混匀，60001pm离心5min，取上清，加人3mol／L醋 3讨论 酸钠50m及无水乙醇1ml，混匀，锄℃过滤，10000rpm 离心10min，弃上清，真空抽干，加80rarE缓冲液目前认为，心肌细胞死亡存在两种形式：细胞坏 (100nmml／Ltris—HcI，20tmnol／LEDTA肿．O)重悬沉淀死与细胞凋亡，细胞捅亡机制在缺血性心脏病发展中 钧+加5lIlRNA*培裱，水浴30ram，点样至琼脂糖凝胶，起着重要的作用。益气通络丹可能通过抗心肌细胞 在50mV电压下电泳，紫外灯下观察DNA电泳图谱。凋亡缺血性的作用，延缓缺血性心脏病病理损害过 1．10 PI与Anlle!xiaffl-v双染法 程，发挥治疗作用。 依照Bofinger mannheim公司提供的操作程序，用孵育缓冲液(内含再给氧能导致体外培养心肌细胞捅亡比率增加。 lOmm删№O咿町．4，140岫∞ol，LN以，5mml／可能与再给氧后氧自由基生成增加，导致心肌细胞损 伤有关，而益气通络丹具有抗氧自由基损伤的作用， IC棚2)洗2遍细胞，然后加100ta。biotin-a．nnexin-v标 心肌细胞凋亡受多种凋亡相关基因调控，益气通络丹 记液(取20ulbiotin．mnexin．V标记储存液，溶于1000tA 孵育缓冲液中，再加20叫的PI溶液)重悬细胞，孵育是否具有调节基因表达作用，有待进一步探讨。 15rain，阴性对照组只加too一孵育缓冲液，再用孵育参考文献 1 M删吣bnaka，Hitodailto．SustmmAdaehi，etal II，砌in血嘴 缓冲液洗2遍．100tASa-Fluos标记液，遮光，4E孵育 RNAincul- 20rain，同时轻轻摇荡。用孵育缓冲液洗l遍，在流式印0J船缸m啦l}l^r蒯o‘pr镐鲥∞《fbrr,e螫enger m 细胞仪下，激发光波长488nm，用515nm带通滤光片neomlalHt∞珂i0叩归．a∞栅on 433 检测sa．11u∞发出的荧光。用560rim长通游光片检测 2史太卓血管通(血府逐痹汤愚粒冲剂)．防己防治家兔髂 川发出的荧光，电子补偿以消除两荧光光谱的重叠， 动脉经皮冠眯腔内成形术后再_狭窄的研究中医杂志(台 在二元直方图按荧光强度定好四象限，其中第三象限 湾)，1994．4(